外周血细胞分离效果不好

zhenghua20

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血液和ficoll平衡到室温，血液用PBS或生理盐水稀释。另外肝素抗凝过量易引起白细胞凝集。

拉二胡的拉尔夫

回复 拉二胡的拉尔夫 的帖子7 v0 F3 n0 i6 |! N, h
- P7 T$ v) \+ N* A: I2 D
密度是1.079，打错了

拉二胡的拉尔夫

回复 why77yhw 的帖子8 ~  c7 O8 u; m; X' [- y
: Y2 m( q" i# S, r& Y7 ~6 q- i: E
我是操作过的，ficoll的核心就是依靠密度差来分离，添加pBS就是破坏1.795的密度。最好是都吸上来，然后添加新的分离液在来一遍。

994545

白膜只是和上清模糊？  那直接吸了 低离心力多洗一两次就好了。。（看得率）  多次这样的话可以考虑加长ficoll的离心时间，你是多少时间？      

momoenn

回复 biluolinyu 的帖子
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额。是从培养箱里拿出来直接用的吗？结果怎么样啊？

biluolinyu

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我有段时间都是直接扔到培养箱里预热的

免疫与细胞

最好最安全的办法就是再离心一次

fenlichong

应该就是没恢复到室温，之前有过4℃放置过夜然后将血液和试剂都恢复到室温分离的白膜层也没问题。

momoenn

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$ j5 p9 q! B" E0 j& qFicoll绝对不能37度预热，或者说不能预热到37度。因为温度会影响密度，我们通常说的密度都是在20°下测的。这也就是看的说明书都要求温度是18-20°的原因

ET生物人

应该抽完血尽快处理，不要放低温的地方或太久！