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脐带间充质干细胞冻存密度   [复制链接]

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发表于 2016-3-22 16:45 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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实验室在培养脐带间充质干细胞,先前冻存密度是2*1000000,活率很好。目前想请教各位,是否可以提高冻存密度,能提高多少?如果是4*1000000会不会太大,细胞活率怎么样? (冻存液为90%FBS+10%DMSO)。望赐教。
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发表于 2018-7-2 10:45 |只看该作者
在冻存的环节上,有很多问题需要注重,冻存液配比(fbsMSO9:1,这个属于奢侈的了,可以尝试培养用培养基:FBSMSO,4:5:1,调试培养基和血清的浓度达到你理想的冻存活率)程序降温,遵循慢冻速溶的原理,会对细胞复苏后的活率起到很大作用,冻存密度,我使用的是FBS:培养基MSO,5:4:1,2毫升冻1×10的7次方,活率在复苏后台盼蓝染色计数活率为98%-98.9%,冻存时注意观察细胞状态,调整血清比例,按密度冻存一般问题不大

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发表于 2018-5-14 11:07 |只看该作者
回复 yooung 的帖子0 d/ |" y5 E& M) o3 m2 t
7 y0 W, i0 G6 h( A  t( P
你好,你是参考的什么文献,能分享一下吗?谢谢你

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发表于 2016-11-11 16:15 |只看该作者
不太建议一管冻存太多细胞,2*10^6/ml算是偏多的类型了,一般是冻存1*10^6/ml,可以上下浮动一点.一次冻存太多虽然节约冷冻保护剂,但是对细胞作用会减弱,导致活率较低,得不偿失.
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发表于 2016-11-11 11:49 |只看该作者
间充质干细胞的冻存密度一般会根据实际收获的细胞数来定,但是不建议一个冻存管冻太多细胞,最多2X10E6,不然细胞活率无法保证.9 ?2 C! R- d) O0 i! q' N1 ?4 ]
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发表于 2016-11-11 11:20 |只看该作者
如果是人脐带源的间充质干细胞,我常规冻存密度是1*10^7/ml;复苏后活率大于90%;我试过2*10^7/ml,复苏后活率依然很高。
9 e' i% j$ z' s! T( k8 j
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发表于 2016-9-5 15:56 |只看该作者
我们一般用5X10^6-1X10^7之间,一般根据细胞状态来
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发表于 2016-8-22 17:16 |只看该作者
脐带间充质干细胞冻存的密度一般为1.0-5.0x10^6,在适宜冻存密度范围之内,密度对细胞的活力影响不是很大。
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发表于 2016-8-16 14:49 |只看该作者
5*10^6以上的我们冻过,没问题,冻存液跟你的一样,只要你冻存的时候细胞生长状态比较好复苏一般就没问题
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发表于 2016-8-16 10:52 |只看该作者
用你培养该细胞的完全培养基:DMSO=9:1的比例冻存,细胞浓度在5*10e6至1*10e7,活率都在90%以上的
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