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求小鼠胚胎干细胞(E14)无饲养层培养基配方 [复制链接]

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楼主
发表于 2016-3-29 07:55 |显示全部帖子
回复 秋槟茗 的帖子
+ s7 y7 [' Y9 e+ U# t( O! r. E* z  v3 f
你想要有血清还是无血清的培养条件,有血清条件相对简单,只要你原来小鼠培养液加LIF和GSK3抑制剂就可以维持细胞自我更新。无血清的条件相对麻烦一些,主要是基础培养液比较贵,就是已经被大家用的很多的2I培养体系。
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沙发
发表于 2016-3-29 09:55 |显示全部帖子
回复 秋槟茗 的帖子2 A4 H1 [; i" t: U' _

9 j  Y/ _  _7 I9 m: gE14是比较容易养的小鼠ES细胞株,无饲养层细胞条件下,单加LIF不足以维持其自我更新,但同时加3uM的GSK3抑制剂CHIR99021就可以维持其自我更新了。培养液就是普通的有饲养层细胞有血清小鼠ES培养液。培养皿用前可以用0.1%的gelatin包被一下。
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藤椅
发表于 2016-4-7 09:50 |显示全部帖子
回复 秋槟茗 的帖子7 F0 B  x. Y5 I: N  u5 X6 H
$ T3 v; i5 j/ V* A. I5 y
我现在用的是找人合成的,你可以网上查询一下。应该有不止一家公司卖这个的,象stemgent。GSK3抑制剂促进小鼠ES细胞自我更新的文章已经有很多报道了,你可以查一下应其龙发的一些文章。
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板凳
发表于 2016-4-14 10:24 |显示全部帖子
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回复 秋槟茗 的帖子
# F- `  j, B* Z4 Q, I7 H& Q: O5 l  I" h8 j* g# e% ?. x! p
DMSO溶解的,储存液配成10mM的,用的时候用培养液稀释10倍成1mM的工作液,(这东西单用无血清培养液稀释会析出很多,所以我一般是用加过N2B27的培养液稀释的。)最终1ml培养液加3ul工作液,这样终浓度为3uM。
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