内毒素检测时机

醉心科研

讨论一个问题，收获过程中大家都是哪一步取样检测内毒素的呢？& ^5 H3 h9 T% G& B! `" d
1）培养液取样 2）生理盐水清洗中取样 3）终产品0 F0 E" I0 G, O$ ^
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如果是2和3，那么问题来了，经过多步清洗弃上清，内毒素还在吗？
3 M$ g9 n& R" v( \! @4 M; |' z& I请大家各抒己见，并盼高人解答。

zmfang555

培养液和终产品需要检测,内毒素能附着在培养器皿和细胞上,而且附着能力非常强,不是稀释和洗涤就能去除的.

醉心科研

回复 zmfang555 的帖子8 `- k# @2 [; _

, c4 s: a+ z; {; z! t附着在培养器皿上倒没事，反正细胞是要拿出来的。
: C9 W* f% i5 ?: q1 c9 f5 N至于附着在细胞上，那就是说还是有另外没有附着的被洗掉了，那测终产品还准确吗？
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测培养液的话，已明确培养液及因子本身会造成假阳性怎么办？
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7 x" t/ ]" `# l/ c- s5 I其实说真的，如果终产品内毒素高到能测出来了，估计袋子里已经染得一塌糊涂了。

aochongyu

我们都是检测终产品，也可以再做革兰氏染色啊

醉心科研

回复 aochongyu 的帖子
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我主要想知道，终产品经过几步盐水清洗了，即使培养中真有细菌内毒素产生，已经洗掉了大半吧？检测终产品能做到控制培养过程吗，感觉只控制了收集过程中用到的耗材有无内毒素？

娟姐姐

清洗第一次进留样检测内毒素

我是传奇

终产品必须检测。其他环节根据自己实验室需要酌情考虑。一般只要是超标不是洗能解决的吧。

xld1984

各个检测阶段，内毒素合理范围是多少呀？

小刘

用1最好，小于等于0.5EU每毫升

momoenn

回复 醉心科研 的帖子6 E) b; S# P4 V+ v; S6 I6 T
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1.内毒素是格莱氏阴性菌死后分泌的，一般细胞如果菌检没有问题的话，内毒素检测也不会有问题。
5 F2 Q) M8 D- u, ]- S0 _6 g1 }: Y2.至于你说的已明确培养液及因子本身会造成假阳性怎么办？我想问得是，你明确了吗？鲎试剂与内毒素的凝胶反应应该是特异性的，鲎试剂就是专用于内毒素检测的，基本上不会与其他物质发生反应啊，如果培养基和因子合格的话，假阳性的几率几乎没有。如果结果阳性，有几种可能：a.培养体系被污染了；b.选的培养液或者因子，也就是培养体系本身有问题。这个你可以通过采购的试剂到货后先抽检保证合格以后再使用；c.检测内毒素的物料耗材有问题，内毒素检测最好使用内毒素检测专用的，而且一定要保证在保质期内。过了保质期，玻璃容器应进行干热灭菌。