内毒素检测时机

momoenn

一般培养过程监控细菌污染情况，终产品收样时进行内毒素的检测。如果前边没有问题，内毒素一般不会有问题的。如果真的确认内毒素污染，那还是别给患者回输了吧

清如许231

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  ~6 s; `( s" I! f% E
那么为什么内毒素偏高的培养液，经过2遍洗内毒素就低于可检测范围？

riverhe_87

关于这个问题，我们这边是这么处理的：
) b3 Q% @2 t, T5 a; q! J2 ]1、培养过程中有几个关键环节是质控点，必须做好相关检测；5 ]+ u) J; C! v7 K
2、内毒素方面，我们是检测细胞洗液最后充悬的样品；因为回输的时候是需要加入20%白蛋白的，而白蛋白我们这边做过内毒素检测，原液是超0.25EU/ml的，后查药典也发现，20%白蛋白药典中细菌内毒素限值1.67EU/ml，而盐水是不存在这个内毒素干扰的（其实白蛋白加入体积对于回输时装袋100ml来说已经稀释很多倍了，内毒素检查含白蛋白的终产品也是可以的）。而我们也会将不含白蛋白的细胞产品留样备查。
8 A3 z6 f; `8 R  [) S3、回输时使用的空袋，我们是会做每批次的抽样检查的。
; a. H* T. M+ g" ]2 @! H  ^4、回输的细胞，我们还有回输前的菌检结果观察，以及革兰氏染色判定。
8 b/ R) h7 e& i3 c总之，多环节控制吧！

清如许231

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你的空袋如何做内毒素检测呢？请问

riverhe_87

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往空袋里面注入10-20ml注射用水，充分混匀，放置一段时间后，取出。一部分检血平板，一部分检测内毒素。

醉心科研

回复 riverhe_87 的帖子& E0 C3 s, ]2 ^
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检重悬后的细胞液，是不是大量内毒素已经被洗掉了（假如有的话）？, m+ p9 m+ W3 {5 ~& o3 {
内毒素是水溶性的嘛。
: X% G8 J* F" C8 V' L1 A2 v这样的结果还能反应出培养过程是否内毒素合格吗？7 w( H& O- K( p& B5 C
就是说，很可能培养结束时培养液内毒素不合格，洗两遍就合格了。同时培养过程中的菌培养结果又为阴性。这种怎么办呢？

醉心科研

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5 K0 A" [; P& i) }4 S- h, S+ S. j( l2 ]4 e) e" E! i
不知道你们有没有遇到过这种情况，洗两遍重悬细胞液内毒素合格，同时培养过程中的菌培养结果又为阴性，镜检也没问题，但培养结束时培养液内毒素不合格。这有可能是怎么造成的，又该怎么处理呢？

riverhe_87

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: N" p8 Y4 A( e# P- D( a1 a
内毒素检测的目的就是保证终产品即回输到病人体内的细胞是没有热源的，即使培养过程中有内毒素，但洗两遍去除了，这也达到了内毒素检测的目的。至于你说的，培养过程中内毒素是否超标，可以根据实验室需要进行一些节点的细胞培养液检测，但是这样的话，干扰因素会比较多，不利于真正的质控。

醉心科研

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0 d# \3 k' J% q* t( E% L有种豁然开朗的感觉，谢谢！/ ?4 G! t& J' j: L/ l# p
我之前可能对内毒素检测的目的有误解。总认为，如果培养过程染过菌，通过盐水洗涤会大量稀释内毒素导致合格，但细菌并不会通过洗涤去除，所以对终产品来说还是有风险的。$ h0 I* {' E8 M0 L& ^
你现在说内毒素检测目的是保证回输品无热源，就好理解了。监控培养过程是否染菌本来也不是内毒素检测的任务，所以才有菌检。
* w/ @( Z( t# ?内毒素检测和菌检相辅相成，但不能互相替代。8 }$ y+ [. k. \! T" i! p. d  t
多亏了这次讨论。

魏夏媛

我们一般都是回输前三天进行检测，如果呈阳性，则取少量细胞培养液按照回输步骤用生理盐水清洗，取清洗后的再次检测