无血清培养MSC的问题

jingjing6837

各位前辈请教一下，用无血清培养基培养MSC，发现细胞出现悬浮成球现象，请问是什么原因导致。之前细胞一直用的含血清的培养基培养，状态一直都非常不错，但是换成无血清后就出现这个现象，有没有和我一样出现过这个问题的前辈吗？现在应如果处理的这个悬浮细胞呢？

qiqishichaoren

我也没养好，尝试过各种培养瓶，比如康宁的cellbind表面培养瓶，比如已包被过的表面。然后养好了，但是用普通胰酶传代法后的培养也是还是个问题。。。

蚂蚁上树

要看你的培养基是什么培养基，没有血清的话，有没有促细胞贴附的成分，MSC一般要用专用的无血清培养基的，不能人为地直接将普通的培养基去血清直接培养。悬浮聚团应该是贴壁细胞悬浮后表面电荷不适应所致。

baby00000003

建议认真阅读一下SF培养基的说明书
8 c0 F2 w' o0 l1 }大部分SF培养基需要配合fibronectin包被的瓶子使用，或者cellbind之类的....# Y: Y) S. W, M, V0 e
有些需要额外添加些东西，比如glutamine
% g$ @& Q% i% v5 ?% W' p可以直接使用的不多，而且可以直接使用的品种效果都不甚理想（个人经验）

未来之星

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3 P  B5 b' F/ Q2 D! L" A
! I9 j9 c7 C. N/ `, n& u# }3 ~能不能上张图

suruyu

同问：你用的什么无血清培养基？有的无血清培养基是需要添加因子使用的

gxbzjznn

细胞成团生长可能有很多原因 1、细胞本身具有成团性（例如、神经干细胞、乳腺干细胞） 2、营养物质匮乏或者不适合细胞生长导致细胞死亡，死亡的细胞会破裂，导致里面的遗传物质溢出，由于核酸等遗传物质具有粘附性，最终导致细胞成团生长。3、培养条件不合适，如温度、CO2浓度、湿度等，导致的培养基环境不稳定！4、其他

未来之星

回复 jingjing6837 的帖子9 s* ~8 u6 Q7 P/ L& C* c0 }
( m9 w+ |+ `1 Q9 n$ @/ p. b& D/ D
是不是细胞这样

meredith603

无血清的MSC我也养过，不会出现悬浮成球的现象，细胞形态和血清中有一点点不一样，但是还是好好的贴壁的。如果悬浮了，应当是不行了。实验条件，培养基，培养箱温度，CO2浓度，所有因素都要检查一遍。

cloudycity

具体是满了脱落还是咋的？给个图看看最好。一般如果细胞悬浮结团，就是死了··· 2 ?6 [7 f) f' j% S: y+ a
1.用的什么无血清培养基？？该加的东西是不是全加了？有可能是你培养基没弄好。. w$ C! a! q' R2 s9 j0 U9 z
2.也有可能是细胞不适应新的培养基，会出现一些死亡的，换液，传代适应一下应该会好。