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楼主: 小猫狸狸
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CIK细胞生长缓慢,出现大量死细胞,会造成内毒素超标吗?   [复制链接]

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15楼
发表于 2016-5-12 15:20 |只看该作者
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内毒素是革兰氏阴性菌细胞裂解后细胞壁释放出来的成分,cik细胞是没有细胞壁的。你可以对细胞悬液进行革兰氏染色、平板检测,排除染菌干扰;再对你所使用的试剂进行内毒素检测,希望可以帮到你!
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14楼
发表于 2016-5-12 15:08 |只看该作者
推测你用的国产培养基。
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13楼
发表于 2016-5-11 11:29 |只看该作者
你可以从试剂添加的源头入手,譬如说因子,血清,相关的抗原或者抗体等,细胞的死亡不会造成NDS的升高,NDS来源于革兰氏阴性菌相关。
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12楼
发表于 2016-5-11 09:42 |只看该作者
回复 小猫狸狸 的帖子7 N* N5 u1 J' Y6 w8 q5 b
& A, N# n- m' I# y) F2 o
1、你可以取正常样品或者这份内毒素超标样品,离心洗涤后用无菌注射用水裂解,测一下内毒素的情况。
& D3 Q* S- P1 \5 ]6 B% M$ }2、β-D-葡聚糖和细菌内毒素都可以与鲎试剂发生凝聚反应,但是旁路是不一样的,你可以选择不会对β-D-葡聚糖其反应的特异性鲎试剂,也可以试着做一下干扰试验。
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金话筒 优秀会员

11楼
发表于 2016-5-11 08:25 |只看该作者
回复 小猫狸狸 的帖子. L9 o* S7 O5 h) |; P
5 G! j% P1 c6 U" }
葡聚糖干扰是不可避免的,一般只能充分稀释了
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10楼
发表于 2016-5-10 15:42 |只看该作者
回复 天冷 的帖子9 l. ^3 Q( D6 R" q5 Q
* p0 ]% b2 w( M" w  r
ph,蛋白质这些东西也会产生干扰。有没有可能细胞死亡裂解后释放大量的蛋白,造成干扰呢。细胞死亡率较高,大概在50%左右。
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9楼
发表于 2016-5-10 15:30 |只看该作者
回复 天冷 的帖子
( S5 L! y) Q& y# [9 k. N% x& k  u1 S4 d  N
细菌内毒素及β-葡聚糖均能与鲎试剂发生凝聚反应,有没有可能是这个原因呢?

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8楼
发表于 2016-5-10 15:12 |只看该作者
回复 拉二胡的拉尔夫 的帖子' n, v3 g0 o% a( c% q! V

/ z4 u0 j/ E" C/ c* Q2 K培养基和生理盐水的内毒素都没有问题,制剂洗个三四遍也合格了。

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7楼
发表于 2016-5-10 15:11 |只看该作者
回复 kelinzjf 的帖子9 {& ~$ h# Q/ R1 P
  Q7 G( |  p, B  S4 q$ z' c; e! K
谢谢了

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发表于 2016-5-10 09:55 |只看该作者
内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的成分,不太可能是细胞死亡破裂造成的干扰,如果没有染菌的话检测一下培养基的内毒素吧,或者如果有添加血清检测一下血清的内毒素
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