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脐带间充质干细胞的一些疑问   [复制链接]

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楼主
发表于 2016-5-10 15:08 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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本人培养脐带间充质,方法如何:剥离脐带中的3跟血管及外面的羊膜,将华通氏胶剪碎贴壁培养、换液、传代......,过程就不细说了。, t$ Y9 \6 B& H4 z1 d
疑问:1.培养出来的细胞里除了MSC外,是否还有其它类型的细胞(具体有哪些细胞)?: N" f5 D# W7 a/ B; [, w
         2. 若有其它类型的细胞如何去除(可否去除干净)?6 w6 e1 b4 J* O9 J, |( x+ G
         3. MSC有其它类型细胞未去除或者未去除干净的话,是否可以认为是存在质量问题,那又何谈应用于临床?7 H3 |  J6 z" z# E( S  j
         4. 细胞的纯度如何检测(个人认为过流式不能完全代替细胞的纯度)?
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沙发
发表于 2016-5-11 10:33 |只看该作者
正常培养出来的话纯度应该很高的,因为脐带间充干相对贴壁比较快,可以通过换液去掉杂细胞。
* ~1 B; w% X! ~, C如果觉得纯度不够高,可以在第一次传代的时候先短时间消化一会,把消化液去掉,脐带间充干贴壁比较牢,短时间消化不下来,可以用这个方法去除杂细胞。
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藤椅
发表于 2016-5-12 09:01 |只看该作者
应该没有其他的细胞.如果要是有的话用PBS洗一下就行,不能用于临床
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板凳
发表于 2016-5-12 09:55 |只看该作者
组织匀浆去除之前要先泡起来的,相对来说可以泡掉一部分杂质细胞
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报纸
发表于 2016-5-12 10:07 |只看该作者
传代两次应该会有比较高的纯度! o- o4 p0 |6 K' o% R9 S  G  H
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地板
发表于 2016-5-12 10:07 |只看该作者
除了干细胞之外,还有脐静脉上皮细胞
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发表于 2016-5-12 10:09 |只看该作者
脐静脉上皮细胞比干细胞圆,胖,短
" @7 T5 e! q3 t4 R
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发表于 2016-5-12 10:10 |只看该作者
在剥离华通氏胶的时候,注意尽量将华通氏胶分离纯,血管清除干净
  c! l0 h, @* v9 ?8 l  F
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发表于 2016-5-12 11:38 |只看该作者
1. 分离脐带间充质干细胞,培养出来的细胞,肯定有其他类型的细胞,如血管内皮等。但我认为,不管是养什么细胞,做原代培养的,应该没有人敢说他能分离出100%纯度的细胞。
2 i$ \0 B1 [4 k- \) F( `: n2. 其它细胞的去除:MSC占优势,其他细胞会在传代时慢慢的淘汰。
& u0 Q& Q9 `6 k7 k5 R  f4 V4 y: u3 k3. 哪家公司会那么傻,用在临床上的细胞,要求100%纯度呢?估计一份都用出去吧,亏死了。应该是高于一定纯度就行了(一般要求不能太高),你还得想着细胞部分分化,衰老呢。另外就是,不是有说法,混杂有一定量的细胞,用在临床上效果似乎更好呢。
! y( W' `2 b9 t2 L4. 个人认为,流式检测可以定性检测,也能定量检测。流式检测不能完全代替,他是取部分样本来检测。要想完全,那只能将你所有的细胞一个一个的检测(流式细胞仪可以做到)。8 r& @; ]+ d: h3 Q3 F
亲,我回复说话稍微有点不温柔哈,只是觉得你有点钻牛角尖了,希望你不要在意哈。
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发表于 2016-5-12 14:59 |只看该作者
回复 田甜 的帖子
* }' O! w, `2 x+ Z) D% n
" t* G6 C- n& K* i7 H. j, @  y9 O不是钻牛角尖,只是这些是实实在在存的问题。就像你所说的,其它细胞会慢慢淘汰掉,但是淘汰了多少?真正MSC的纯度又是多少(不是说纯度要绝对100%)?其它的细胞种类有没有做过鉴定(不能仅凭猜测或推断),是否对于临床产生何种影响(有利的还是有弊的)?这些都不太好确认吧,如果就这样稀里糊涂用于临床了,难道不会有安全隐患嘛(这一点目前谁也说不清)
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