脐带间充质干细胞的一些疑问

zhangjieyctc

本人培养脐带间充质，方法如何：剥离脐带中的3跟血管及外面的羊膜，将华通氏胶剪碎贴壁培养、换液、传代......，过程就不细说了。. m( D" m( R6 V5 h' r# y2 x: `, T
疑问：1.培养出来的细胞里除了MSC外，是否还有其它类型的细胞（具体有哪些细胞）？5 X- B. _3 T) m0 r  F( N1 J* q- U
         2. 若有其它类型的细胞如何去除（可否去除干净）？( i7 e' a/ {  Y2 ]3 M% M0 U
         3. MSC有其它类型细胞未去除或者未去除干净的话，是否可以认为是存在质量问题，那又何谈应用于临床？8 |+ v+ w5 i7 ]# r
         4. 细胞的纯度如何检测（个人认为过流式不能完全代替细胞的纯度）？

fenglinzhu

正常培养出来的话纯度应该很高的，因为脐带间充干相对贴壁比较快，可以通过换液去掉杂细胞。1 o: L9 s5 L, L6 v/ v
如果觉得纯度不够高，可以在第一次传代的时候先短时间消化一会，把消化液去掉，脐带间充干贴壁比较牢，短时间消化不下来，可以用这个方法去除杂细胞。

晗晗

应该没有其他的细胞.如果要是有的话用PBS洗一下就行，不能用于临床

Natalie

组织匀浆去除之前要先泡起来的，相对来说可以泡掉一部分杂质细胞

wuhuaguo88l

传代两次应该会有比较高的纯度
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Natalie

除了干细胞之外，还有脐静脉上皮细胞

Natalie

脐静脉上皮细胞比干细胞圆，胖，短1 `4 ~* M4 n6 q( J, l2 I9 z

Natalie

在剥离华通氏胶的时候，注意尽量将华通氏胶分离纯，血管清除干净
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田甜

1. 分离脐带间充质干细胞，培养出来的细胞，肯定有其他类型的细胞，如血管内皮等。但我认为，不管是养什么细胞，做原代培养的，应该没有人敢说他能分离出100%纯度的细胞。2 I$ e7 O) A& z, U0 N- n
2. 其它细胞的去除：MSC占优势，其他细胞会在传代时慢慢的淘汰。
. m, c$ V9 M8 y4 i) S+ |( p3. 哪家公司会那么傻，用在临床上的细胞，要求100%纯度呢？估计一份都用出去吧，亏死了。应该是高于一定纯度就行了（一般要求不能太高），你还得想着细胞部分分化，衰老呢。另外就是，不是有说法，混杂有一定量的细胞，用在临床上效果似乎更好呢。; m% G- o2 H' R$ }; S
4. 个人认为，流式检测可以定性检测，也能定量检测。流式检测不能完全代替，他是取部分样本来检测。要想完全，那只能将你所有的细胞一个一个的检测（流式细胞仪可以做到）。
% J  U3 ^/ @. K& f/ A亲，我回复说话稍微有点不温柔哈，只是觉得你有点钻牛角尖了，希望你不要在意哈。

zhangjieyctc

回复 田甜 的帖子* u' b- X0 h  B5 V! ^% x$ C% m

& y4 S% _2 ?, W1 R不是钻牛角尖，只是这些是实实在在存的问题。就像你所说的，其它细胞会慢慢淘汰掉，但是淘汰了多少？真正MSC的纯度又是多少（不是说纯度要绝对100%）？其它的细胞种类有没有做过鉴定（不能仅凭猜测或推断），是否对于临床产生何种影响（有利的还是有弊的）？这些都不太好确认吧，如果就这样稀里糊涂用于临床了，难道不会有安全隐患嘛（这一点目前谁也说不清）