［求助］这份PBMC怎么回事儿？

nailute1985

事情是这样的，我用同一份脐带血提的PBMC，分成两组，第一组加的是可溶性的OKT3，第二组是包倍的OKT3。但是发现在我把第一组PBMC加到瓶子里面之后，过了仅10几分钟，就有很多细胞贴壁死亡了。虽然我们原来做的PBMC有一部分肯定是也会贴壁，但是都是正常的单核细胞贴壁，折光度很好的。这次这个都是黑色的死细胞，而且死亡事件太快了！如果是细胞问题的话，另一份加到包倍后的瓶子里的细胞就没事儿。求解……. J) j& ~7 k- @) Q7 ]6 l
、. Q2 S& i$ ]- t2 B+ A
上图是第一组+ X/ S6 v# y0 n+ R4 G; }# p. E
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这是第二组
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nailute1985

回复 momoenn 的帖子
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7 ~( Y: D' M5 G. R' p9 \这两个都是D0天的，没染色，那些黑色的就是死细胞。

nailute1985

回复 hello_yun雨 的帖子
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1 P  K. Y7 Q. P试剂肯定不会过期的，都是4度保存的，刚分装好的。

nailute1985

回复 veda327 的帖子
7 H' [# h) q& j, m6 Q( C0 O9 d: ]9 G6 C& p5 t. {
黑色的就是死细胞，可能还没到碎片的那种程度。

nailute1985

回复 veda327 的帖子
2 l9 J  Q: O' A+ U0 d1 B2 ?- X) Z% v" y6 H4 C. R4 R( H& U
但是原来我们也是这么操作的，问题是，就算我OKT3加的量多少，不可能刚加进去没几分钟细胞就成这样子啊

nailute1985

回复 张月儿 的帖子0 @& R$ }& U. F
+ i, ~3 y4 M* k+ e* s1 z# i" f
但是我用OKT3包被就没啥问题

nailute1985

回复 lgfffancy 的帖子
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怎么解决的？找到原因了吗？9 D, v* v; P6 _0 a

nailute1985

回复 lgfffancy 的帖子
4 D8 q6 @1 z6 P4 `+ K
. z+ p# F! @2 r7 X- ?我这个肯定不是

nailute1985

回复 奇幻雪蓝 的帖子5 k7 u1 b/ _. t( u+ T
% e2 E$ \: C" P. |5 w
细胞形态啊，这马上就能判断是死的细胞啊。。。什么叫做PBMC分离纯度？本来PBMC就不是纯的细胞

nailute1985

回复 gxbzjznn 的帖子/ o* R- f, e1 H# p5 E
% l) Q; ]6 f9 g2 `$ w$ Z
贴壁的PBMC如果是活的话，折光度很好，而且只是不会移动而已，这个黑色的难道不是死了的细胞么？活细胞就算贴壁尤其是PBMC的话 也不是这样子的啊
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