单个核细胞存储相关问题

鸵鸵

有没有做过脐血单个核细胞存储的啊？用的冻存液是什么？另外单个核细胞复苏后还需要用因子刺激再培养吗还是直接使用？

xieyun20052005

$ m, p3 j/ N( y* Q# Y3 g/ h

4 G' A2 [) k/ k5 ]这要看你使用的目的，要是激活别的细胞PBMC肯定要加相应的激活剂刺激的，PBMC仅仅是个种子细胞，根据需要添加不同的细胞因子。冻存的试剂可以是FBS:DMSO=9:1或者现在很多现成的冻存液可以直接使用，后可以实验一下，一般来说都是有死细胞的

zhoushuiguan123

脐带血复苏后需要培养后使用？不是直接复苏后直接使用啊，培养后再使用那还是造血干细胞吗？

sfnana

我冻存用过90%FBS+10%DMSO和70%培养基+20%FBS+10%DMSO 2种冻存液，第一种复苏后效果比较好。复苏之后最好先养1天，在根据实验需要加入诱导因子。

zhoujp3651

90%FBS+10%DMSO
0 Y8 N# a% `* d/ N' r30%培养基+50%FBS+10%DMSO
# [4 E- X5 P- u& B% J" @70%培养基+20%FBS+10%DMSO' l: {; o0 _9 b( _6 d) d# F: o
以上三种都可以，效率差不多

iytbxxg

回复 UlissesJR 的帖子
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非常感谢！！

UlissesJR

回复 iytbxxg 的帖子
# ]; P9 L) d  u# D: |$ Y8 [: ]% {: |, Q  U
没问题，之前临床一直这么做，只要你冻存没问题

iytbxxg

回复 UlissesJR 的帖子9 y/ _* J' [: ~0 W3 u1 N
0 u4 ]/ E  ~3 |' Y. g( U
这样啊，活率会增高吗？谢谢啦！！

UlissesJR

冻存10%DMSO+90%的血清（如果有自体血浆，就用自体血浆），复苏后先着急加因子刺激，刚复苏的的细胞先加培养基（不含因子）在培养箱放3-4个小时，让细胞适应一下，这样细胞状态会好点，经验之谈

iytbxxg

回复 18560211236 的帖子8 q2 M6 q, D9 d6 r
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活率是多少算是正常的呢？都说pbmc冻存后复苏活率都低！