单个核细胞存储相关问题

鸵鸵

有没有做过脐血单个核细胞存储的啊？用的冻存液是什么？另外单个核细胞复苏后还需要用因子刺激再培养吗还是直接使用？

随时准备下线

冻存液应该还是以DMSO为主，当然，也有一些其它的。一般不会复苏后直接使用。

gondobar

冻存液DMSO+血清，复苏后培养，因子IL2是必须加的。

yingfeixiang

冻存液可以是DMSO加自体血清，也可以DMSO加白蛋白。直接用的少，可以诱导培养。

生物太次郎87

一般冻存液为血浆：DMSO=9:1，冻存后复苏回输（类似造血干移植）还是再培养？再培养就接种在培养基里、添加因子刺激培养，欢迎技术交流。

鸵鸵

回复 yingfeixiang 的帖子8 ^3 D. M/ A8 |9 ]$ V* H( |
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哪种冻存效果好一点呢？存活率高的话才能利于后期培养啊

鸵鸵

回复 gondobar 的帖子7 m/ \" Q& K/ Z0 ?' n9 T9 @4 O  `
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复苏后培养的话，IL-2只是刺激细胞增殖的，需不需要添加什么其他刺激因子诱导为其他类型的细胞再进行使用呢？还是直接刺激增殖依然作为单核细胞使用啊

gondobar

回复 鸵鸵 的帖子
' ^9 F" P) f9 c) l
8 F* T8 g$ W  r: ^* v  A) m, ]和你冻存时间有关，冻存PBMC，当然加各种刺激因子。冻存刺激过的细胞，单纯增值就行。冻存最终制剂，复苏保证活率和阳性率就行。

yingfeixiang

回复 鸵鸵 的帖子' K& r, m. L; L1 B4 k8 H
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肯定是自体呀，什么也不如自己的不是。

645149980

1 T' Q1 b9 b9 I  D
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我试过FBS:DMSO=9:1，冻CIK，也试过培养基：FBS:DMSO=7:2:1冻，还有DMSO加人血白蛋白冻，复苏后细胞都长得挺好的，就是多少还是有一些影响，还是有部分细胞死亡。复苏用的是原来培养CIK细胞一样的培养基，加入了相应的IL-2。