脐带间充质干细胞原代培养密度达80%-90%后，传代时怎样将组织块与贴壁细胞分离呢？

cxs

如上面各位所说，大的组织块我们在传代之前就移除了，用PBS润洗，拍打下基本就下来了。剩下极小的我们没移除，传一代会有部分很小的组织块残留，此时已经不是贴壁状态了，很容易就在换液过程中去除，传二代基本就看不到了。个人见解：除非你要用的就是严格无组织块的原代或者P1，否则没必要浪费过多精力在这上面。

cxs

回复 只因偶然 的帖子
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0 Z* P' y2 b3 C我们养在T75瓶，相对还比平皿麻烦一点，我们是这样的：前期等它贴牢了之后加入10ml培养基，之后试过5天才换液都没问题，爬出来状态也很好。也试过3天换液，也爬出来了，并且感觉区别不大，我们这几天压根就没去理它，关键就是少动它。等到细胞爬得多了，就要按养细胞的换液频率来了。换液的时候我们就是轻侧，用巴氏管小心吸取，多少会有一些损失，但不要在意，丢了就丢了。并不是所有脐带都能爬出来，也并不是所有组织块都能爬出，及时止损，别浪费时间。祝顺利！