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[求助]关于DC细胞培养问题   [复制链接]

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楼主
发表于 2016-7-12 12:52 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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本帖最后由 nailute1985 于 2016-7-12 12:55 编辑 & B7 p4 z! i$ V
6 `% L! a) F* q0 ?  ~1 X
各位吧友,想请教一下,我用复苏后的PBMC常规培养DC,PBMC总数2*10的7,接种密度2*10的6/ml于T75,培养基vivo15+0.5%HSA+1%自体血浆,贴壁2h之后,PBS润洗一次,去除未贴壁的细胞,加GM-CSF 1000U/ml、IL4 1000U/ml,培养过夜之后发现细胞绝大部分都飘了,但是前一天镜下观察细胞贴壁贴的非常非常牢,不知道有谁遇到过这种问题么?是冻存的PBMC的问题还是别的问题呢?望赐教~PS:冻存的PBMC是健康人脐带血分离得到。
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沙发
发表于 2016-7-13 09:02 |显示全部帖子
回复 lele 的帖子
( I: E/ t8 P0 C2 \  D& u. C
$ g) l! R) O8 k8 @/ {( S. Q! T复苏后的状态很好,活率98%左右。其实不是细胞状态的问题,是应该贴壁反而飘了。。
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藤椅
发表于 2016-7-13 09:03 |显示全部帖子
回复 hahawang303 的帖子# o5 w/ N8 e9 x1 N6 y. Q

: `! @: t, E) y: p2 M" O; f是,但是第一天贴壁贴的非常牢,第二天飘起来这就有点诡异了……如果是瓶子的问题,第一天贴壁就应该不好才对。。
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