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楼主: woshibotao_01
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[请教] 冻存管的问题   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

14楼
发表于 2016-9-5 15:31 |只看该作者
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本帖最后由 sfnana 于 2016-9-5 15:35 编辑 + M' e4 _5 ?! P8 q, _! G* |3 {

3 M# R( j# F0 I0 X! z) t: O个人感觉内旋外旋都可以,我们用的是corning的冻存管,关于爆管的问题,无论内外旋的都有可能发生,原因就是冻存时液氮进入冻存管,所以拿出来的时候,温度快速升温,扫成爆管,所以可以将冻存管拿到液氮灌口处时停留一下,再拿出来,让冻存管内的液氮挥发一下,再正常复苏,这样基本不会爆管。
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13楼
发表于 2016-9-5 15:30 |只看该作者
我认为内旋外旋都可以吧,防止爆管可以在冻存的时候控制一下量,防止进入液氮体积过大
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12楼
发表于 2016-9-5 15:24 |只看该作者
相对情况下,还是用内旋的比较好,我们一般都用封口膜绕紧,不过温度过低,可能会裂掉。
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11楼
发表于 2016-9-4 15:49 |只看该作者
外旋不容易污染。至于爆管的问题,和内外旋无关。从液氮罐拿出来的时候把冻存管里面的液氮倒出来就可以了。
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10楼
发表于 2016-9-4 14:58 |只看该作者
液氮冻存用内旋的,不过这不是最直接的解决办法。最直接的办法就是用气相储存罐。再一种比较经济的方法用封口膜包裹。
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9楼
发表于 2016-7-21 11:52 |只看该作者
回复 nichifanlema2 的帖子
2 a; M6 M2 k. X7 t$ I% W' t$ e2 @& c) E  }
感觉您说的比较有道理,谢谢

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8楼
发表于 2016-7-18 09:30 |只看该作者
赛默飞的讲座上有说,外旋冻存管是为超低温冰箱设计的,不适用于液氮储存系统。液氮冻存容器推荐使用内旋冻存管。
- m; ?9 R* W+ V, ~( i8 v& R冻存管发生爆炸的原因: 不同的材料收缩速率不同,在降温过程中难免会产生微小的缝隙,此时可能会有少量液氮进行到冻存管内。 在“复苏”冻存样品的时候,如果冻存管的缝隙中残留有液氮,放入37度水浴时,将会发生爆炸,造成样品的损失和实验人员的伤害。6 `, Q+ k$ s7 a  ]5 y
从液氮拿样品时注意个人防护,戴上面罩、手套,穿上防护服等。1 S8 Z9 F5 R8 ?' w$ S7 h* a
较常用的冻存管品牌同楼上,如NUNC  corning等。
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7楼
发表于 2016-7-18 09:09 |只看该作者
在液相环境下  内旋的比外旋的爆管几率小   另外个人觉得内旋的污染风险低  我们使用外旋都是装不需要无菌的样品   至于品牌 NUNC  corning 都有用   也都可以
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发表于 2016-7-15 08:51 |只看该作者
80℃冰箱的话内外旋都无所谓,在液氮的液相里要用内旋的,气相的话也无所谓吧。都用内旋好了,安全
, U+ ~9 [) d- r  J  F5 z6 ]
$ }7 |/ R. {# a+ @  G$ d/ e-80,气象液氮,内旋,外旋没区别。液相最好用内旋,虽然内旋、外旋都会进液氮,但内旋的爆掉的概率小。
) l2 `( ]5 t% _( V( B. U/ C$ j* _, ^! y/ g  o
9 l! }4 @2 K* w" ~) Z) B3 C
内旋冻存管的容积相对外旋来说,要转的稍微少点,但在液氮这种超低温条件下,可以防止因冻存管收缩不一致而导致液氮通过螺纹进入冻存管内。所以一般液氮冻存用内旋的。其余情况要求就没这么严格
+ S: V5 J) N- g+ T0 X+ s( N/ ~: b1 v4 E4 H! A5 C& \5 k3 i
3 i* n& R  i6 B
内旋和外旋的冻存管一点区别是它的底部,内旋的可以很清楚的看到底部的情况,而外旋因带有齿轮状的圆形底部遮挡了而看不清底面。这点区别在细胞复苏离心后吸去冻存液时,个人觉得很重要的,内旋的可以很方便的看清液体被完全吸走而又不吸掉细胞,外旋的冻存管那就可能会吸掉细胞了。在冻存方面应该没有影响。6 p8 M1 D4 A# I; R6 y

: N' [) G" M9 x' o
& G0 S  |; k* F+ ?放液氮的话用内旋比较安全!
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报纸
发表于 2016-7-14 18:01 |只看该作者
回复 woshibotao_01 的帖子
0 a/ J) ]& ~  e3 Y% x+ U. A
9 t; q( v& d+ P& |) v8 B+ i内旋和外旋我都用过,用于冻存细胞,都是可以的,复苏率上没有太大差别。入液氮后拿出复苏也都有爆管的可能性。一个简单的解决方法是,拿出后待液氮挥发完,稍将旋盖拧松排出液氮气体,再拧紧复苏。另外,外旋盖有一个小小的优点,冻存时一下可以操作好多管。内旋的如果需要操作很多管,需要将内旋盖倒置于桌面,盖上时再拿起来,因为盖比较小,所以增加了与旋盖内部的接触几率,增加了污染的风险。
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