请教干细胞传代是用胰酶消化和细胞刮哪种方法更有利于细胞生长

splinkerette

没有人推荐Accutase吗？相对胰酶要温和一些，对于细胞损伤小，而且细胞分离得很完全。最开始用的Millipore的，但购买起来不方便，现在一直在用Gibco的，感觉也不错。说明书上还特意说了不用离心，不用终止消化。

splinkerette

回复 lgfffancy 的帖子5 J. `  t; C" w! a& J3 s

9 V' ~6 m) }) K# ~# q( U我做的小鼠胚胎干细胞，用的都是0.05%。买的0.25%的，自己稀释了5倍

splinkerette

回复 Jiangshi90 的帖子
; N0 ?, ~( N4 t- J, [+ |' b7 \" i, c1 u* a0 H8 a: B
具体的原理也没深究过，只是protocol上都说的是有蛋白酶和胶原酶活性。附一个网上最常见的说明：, z; d& |0 k" Q9 n
Accutase是包含有蛋白水解酶和胶原酶活性的一种细胞消化液，是胰酶/EDTA消化液的完美替换产品，用于从常规组织培养器皿和粘附培养器皿中消化细胞。适用于组织解离和细胞分离，因分离后的细胞能保持完好的表面抗原，且不含任何动物动物或者细菌来源组分，可满足对后续如细胞表面标记、病毒生长分析、流式细胞分析以及生物反应器相关检测等多种实验的要求。与传统的胰酶消化液相比，本品具有以下优势：1）适用于绝大多数原代细胞和哺乳动物细胞系的消化，以及昆虫细胞；2）温和有效的消化干细胞（hESCs和mESCs），冻存后细胞具更高复苏率；3）几分钟内实现粘附细胞的分离，不需清洗或中和反应，节省细胞传代时间；4）对细胞消化较为温和，能增加细胞产量和存活率；增强细胞贴壁效率；改善细胞形态和细胞生长特性等。