胎盘间充质干细胞培养

鸵鸵

想做胎盘间充质干细胞，苦于没有经验，用胶原酶消化，又不知道怎么去把握度，哪位大神能不能告知一个成熟的方法啊，或者直接用组织块法怎么操作啊

damowang

你是做胎盘哪个部分的干细胞？绒毛膜？羊膜？底蜕膜？

鸵鸵

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组织块和绒毛膜，有什么好的方法和关键控制点吗？组织块也尝试过直接贴壁培养，但周期很长且有些爬不出来，胶原酶消化也只是在摸索中

damowang

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组织块是胎盘小叶吗？  绒毛膜的话我是用贴壁法养的（和脐带间充质干细胞一样的方法），用12%的FBS-DMEM/F12，大概到9天有细胞爬，第15天的时候可以传代。
; \  S8 z5 H7 i  _) }8 x小叶使用酶消化的方法。消化出来的细胞没有养过。

damowang

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组织块清洗干净后，我用酒精消毒5秒，立即用大量盐水冲洗浸泡。培养过程中就不添加抗生素了。还有抗生素的细胞比较难爬出

鸵鸵

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9 q& A/ H9 P, }9 I好的，谢谢，你的胎盘小叶消化多长时间呢一般，我们是控制在40分钟左右，用的是0.1%一型胶原酶，但是有的胎盘可以养出来，有的养不出来，不知道具体问题出在哪里

632129046

一共养了两次，一次爬出来了，另一次等了15天也没见爬出来