细胞治疗的T细胞，NK细胞大家分离人外周血PBMC后怎么诱导扩增培养的？

920450509

初次涉入细胞培养这一块，对于免疫细胞如何特异扩增单独培养一直都不是很懂，是PBMC先分离出来一直培养，达到一定数量后进行分选，检测，还是先将PBMC分离成不同类群的细胞，然后针对性地进行各类细胞的特殊培养？依据是什么？培养要求条件具体是？求大神指教。

yingfeixiang

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0 L) t0 m: A+ B$ l: x* s/ O; q
$ s  y$ e) h+ [' W2 e现在一般都是外周血分离出PBMC后，诱导培养。如果在进行分选或特殊培养费用很高，不做研究没有必要吧

moluxingke

看你的目的了，如果强调应用，那几乎都是诱导培养的，不然的话需要好多血才能分离出足够的你想要的细胞类型再继续进行培养的。如果是研究那就另当别论了。

细胞之家

免疫细胞培养，比如T细胞、NK细胞、或者DC细胞，通常是抽取一定的外周血，通过密度离心，分离出PBMC，根据目标细胞，采取不同的诱导方式。
! e9 L( ]1 y6 i为了获得高纯度、数量多的细胞，可以采用包被培养瓶的方法，当然包被培养瓶的细胞因子，目的很简单，就是抑制其他细胞，诱导和激活目标细胞。处理后，就是扩增阶段，一般加入不同的扩增因子，比如NK至少需要IL-2，DC细胞需要GM-CSF、IL-4,等等。
4 Q3 d* v" h  _) w: g& ]有时候，对纯度有特别要求的，多采用磁珠筛选，这个费用高。3 b- t! I8 Q& H1 i4 G* A) H. H- m
在此基础上，选择合适的商业化培养基，也是关键。4 b- g" J. F- u' g- [% Y1 y; b8 a

奇幻雪蓝

激活是怎样一个过程？细胞培养的整个过程是先激活再扩增，还是边激活便扩增？

yingfeixiang

回复 奇幻雪蓝 的帖子7 e8 K7 R6 J9 X! Q- k2 d& v7 ~
8 s. a4 V% m1 I* t3 Q
是先激活之后在扩增的

奇幻雪蓝

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: m2 b1 a6 L) b: l% `' R- x8 z4 u9 p
激活需要多久？激活后，在显微镜下观察细胞有特殊的形态么？和激活前有什么不同？

yingfeixiang

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多久？就是加入活化液（刺激因子），没什么特俗的

Liyun65

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: e; K+ \. e  n. \3 u4 t
# T4 z3 f1 d) W' S; C! ]就我培养的细胞看来，前期细胞都比较园，到后期CD56+、表型比较多的时候，会有很多长梭形的细胞。

大少爷

看文献所有问题都解决了。