间充质干细胞接种培养皿的接种浓度

阳光正暖

间充质干细胞接种培养皿时候一般按什么浓度来接种，按表面积还是体积，每cm2表面积接种多少量细胞比较合适，常用100mm和150mm的培养皿，请教各位大神

UlissesJR

不知是原代培养还是传代培养，以体积ml和表面积cm2计算都可以，只是不同文献上据各个实验室方法表述的不同而已4 E1 E- u, M0 j: q" c" r4 r. m: R
1、原代培养密度大一些，注意观察细胞爬出及生长情况，及时换液。
0 r1 c& I, ^  f! t" z. @2、传代P1可以调整(2.5~5.0)×103/cm2，2~8代细胞以5×103/cm2都可以) Q1 U2 @+ y7 E
3、按体积可以调整密度到1×104/ml的数量级。
3 D) Y8 m9 j0 i0 F0 f. u% |% c( s3 d4、如果诱导分化可以密度大一些调整密度到1×104/ml9 x8 w" T3 t4 ?7 {, V
个人拙见，望有帮助

沙漠狐o0

按照培养基上给出的接种浓度。
2 b5 ^3 T! D! v$ q% m3000-10000/cm^2。

阳光正暖

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3 f" F. s/ g9 o谢谢啦

单个核细胞

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. l& s: ^  C4 `5 B" V$ M/ I5 e7 _1 o6 S5 v8 E
建议1×10^4/cm2。

cuijiaoyan

传代MSC细胞8000/cm^2

kiss2346

差不多4000~8000/cm^2  的样子     

saliai2016

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( e  m4 G6 Y; E, @0 ?& z% ?0 ?6 W; I* B5 }6 |" u' u
(2.5~5.0)×103/cm2，明显太低了，间充质干细胞的接种密度虽然与培养基配方好坏有关，但过低不适合细胞传代培养。个人建议1×10^4/cm2。这样的细胞3-4天就可以传代培养，一传三-四绝对没有问题

saliai2016

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  A: s/ j5 R2 c0 ?5 d% W/ A4 j! X8 ^' s% m. m8 H
同意

ltickp

P1之后：100mm的培养皿接种2~5*10E5个细胞比较合适，不然细胞太少种不均匀细胞状态也不好，活率也要达70%以上，不然细胞长得慢，状态也不好；P0建议种大点至少是5*10E5，而且接种后皿中应该还能看到团状物质，建议贴壁细胞较多时就换个液