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间充质干细胞接种培养皿的接种浓度 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2016-9-7 16:45 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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间充质干细胞接种培养皿时候一般按什么浓度来接种,按表面积还是体积,每cm2表面积接种多少量细胞比较合适,常用100mm和150mm的培养皿,请教各位大神
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沙发
发表于 2016-9-7 17:36 |只看该作者
不知是原代培养还是传代培养,以体积ml和表面积cm2计算都可以,只是不同文献上据各个实验室方法表述的不同而已
3 l" r9 d- v. d: K7 H6 [3 g+ L1、原代培养密度大一些,注意观察细胞爬出及生长情况,及时换液。
3 ~0 a# k, k8 x" J3 z, u2 ^: A1 q2、传代P1可以调整(2.5~5.0)×103/cm2,2~8代细胞以5×103/cm2都可以
2 l7 g  U8 i0 s, T$ Y) f  O3、按体积可以调整密度到1×104/ml的数量级。1 ?6 G, G0 s' e0 o3 I: G1 `1 D
4、如果诱导分化可以密度大一些调整密度到1×104/ml1 n! ~' b1 |' d! u- g0 j& T3 p* k
个人拙见,望有帮助
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藤椅
发表于 2016-9-7 22:29 |只看该作者
按照培养基上给出的接种浓度。
0 o% R& u: Z" t  s$ j9 V# q3000-10000/cm^2。
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板凳
发表于 2016-9-8 09:29 |只看该作者
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/ t0 p' E1 f9 ~5 N  {7 D9 {1 `# J% E
' W0 a0 o3 n! f( O谢谢啦

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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

报纸
发表于 2016-9-9 18:02 |只看该作者
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3 U- W+ u4 D- e( V6 h1 ?2 E- N3 O, p6 g( r/ v0 i% \$ X5 B- t
建议1×10^4/cm2。
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地板
发表于 2016-9-13 09:40 |只看该作者
传代MSC细胞8000/cm^2
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7楼
发表于 2016-9-20 10:13 |只看该作者
差不多4000~8000/cm^2  的样子     
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8楼
发表于 2016-9-22 10:44 |只看该作者
回复 UlissesJR 的帖子  [. b( }) M0 `. @2 C" F4 o2 Q
8 H1 `+ K* r1 J' Y
(2.5~5.0)×103/cm2,明显太低了,间充质干细胞的接种密度虽然与培养基配方好坏有关,但过低不适合细胞传代培养。个人建议1×10^4/cm2。这样的细胞3-4天就可以传代培养,一传三-四绝对没有问题
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9楼
发表于 2016-9-22 10:45 |只看该作者
回复 单个核细胞 的帖子
1 w( y( U/ ~) s9 M0 I8 ~- N
% [' [1 f# ^" a. ^! g同意

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10楼
发表于 2016-10-20 14:51 |只看该作者
P1之后:100mm的培养皿接种2~5*10E5个细胞比较合适,不然细胞太少种不均匀细胞状态也不好,活率也要达70%以上,不然细胞长得慢,状态也不好;P0建议种大点至少是5*10E5,而且接种后皿中应该还能看到团状物质,建议贴壁细胞较多时就换个液
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