脂肪间充质细胞消化、收集的问题

田甜

亲，不都是用胶原酶消化的吗？很少用胰酶吧。

田甜

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+ S; J: ]' K$ ^9 w; M/ X9 V+ \4 A- E& k4 i0 X: H
哦，我理解错误。* x* W7 _2 i' [, e) h( `& f1 s
原代本来就不好消化一下，PBS润洗，去除残留血清培养基。不知道你的胰酶里面是否加有EDTA，一般0.25%胰酶-0.05%EDTA，这种组合好像对绝大多数细胞效果都还可以，要是还是很难消化，放培养箱，37℃消化。
3 o9 u4 A4 d4 y6 Q我这边做过原代，差不多80%汇合度的时候，原代消化每T75可收150万左右的细胞。& t* j: `$ {0 F5 |. B  c+ ?  c, v

田甜

不知道你说的人的还是大鼠的，或是其它来源的。
; Y0 d8 e/ Y* q: D  ?0 X我这边就猴子的脂肪干细胞计数过，P2、P3一般情况是300万-400万。主要是看培养条件吧，细胞状态好的时候就能收怎么多。

田甜

回复 swtarron 的帖子6 q6 @# P: v' D5 T" q2 T; T  e7 Q

+ O+ \6 e  k4 X" O2 T今天收了一个人的P1代，一瓶T75收了约400万。培养基用的是无血清培养基，专门养间充质干细胞的。

田甜

回复 swtarron 的帖子  V; t3 k) J6 M; ^/ p

, K# `. S: M; Z/ u亲，培养基应该不一样，用血清培养基培养的脂肪干细胞肯定比无血清培养基培养的要大一些。不过我才开始养人的脂肪间充质干细胞，数据还不可靠。