免疫细胞体外培养生长特性

ltickp

分离外周血PBMC后，体外活化培养扩增培养中免疫细胞特性，如何判断细胞生长速度达到最快

baby00000003

这只是我瞎猜的，hoechst或者DAPI染一下核，然后流式看看荧光强度，可以反应DNA的复制活跃程度吧，然后就推算出细胞分裂速度的变化趋势

UlissesJR

测一个生长曲线

woshibotao_01

回复 ltickp 的帖子1 u9 p6 M% F) K5 D$ L& P

- B- j5 J( j/ k1 v0 d一般使用血细胞计数仪，先吹散细胞团再计数，根据生长曲线判断2 ~" s" L9 `. b% s9 c

: K& p5 _: m9 e- n另外也可以做流式，测细胞周期，总之都要吹散

honey棉花

用CFDA-SE染色细胞，流式检测荧光强度。或者用CCK8染色，用酶标仪检测，可以观察整个培养周期

niliu730323143

种96孔板，每孔细胞数相同，可以添加复孔。不同时间进行CCK8染色，用酶标仪检测，做个标准生长曲线，应该是最简便的方法了吧。

stella2015

通过最简单的方法吧，看你的图片，可以算是镜检的结果吗？T细胞的生长状态并不是很好，第一、二张图片显示细胞碎片很多，你要是细胞染色的活率应该不是很高吧，细胞边缘不饱满，折光率不高，说明细胞大多处在凋亡期，如果不及时处理，可能很难长起来。第三张图片细胞大片聚集成团成云雾状，不透光无折射率，应该是大片死亡的细胞聚集而成，细胞状态非常不好的说，能不能长起来很难说~~

ltickp

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3 I$ `, E# ], T
( Z8 }" n% o1 y5 y1 b6 t4 F* S转袋后长得非常快，900ml培养液颜色2天就很黄了

nailute1985

回复 stella2015 的帖子( ~  x( Q, m/ k/ q1 r0 K

0 e2 q$ o& K& f7 c  g* M# W哥，明显这三张图细胞状态非常之好，活化的T细胞增殖初期就是大片的细胞团，死细胞团不是这样的

stella2015

回复 nailute1985 的帖子5 N& n7 i7 m/ ~9 {
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抱歉我是以一般转染完慢病毒的T细胞状态好坏作为判断经验，如果是转染完的细胞状态是这样，转染结果多半不会太好~