细胞复苏解冻问题

qinchuanniu

复苏时注意的问题1、提前最好各项准备，如将细胞洗涤液预温后，加在刻度离心管内，放在超净台内；2、解冻时水温39-40度，水量要大一些，1个冻存管可用200-300ml的水；3、待冻存管内细胞液部分已解冻，用毛细滴管吸入预先准备好的细胞洗涤液中吹吸几次使全部解冻，4、整个操作控制在1min内。这样可最大限度的保存细胞活性。

UlissesJR

冻存体积小一点，一般1ml，复苏温度42度

niliu730323143

温度调高，40-42度应该都没问题，使劲晃，看到还有一点小冰粒就拿出来。建议冻存时500ul冻存足矣。

fm001982

再次对大家的建议和帮助表示衷心感谢，虽然是小问题，但我会用心记下，并传播给更多的人~

leizi

回复 fm001982 的帖子4 D) d. X* l% A6 C& s
4 k& U0 H, o# B$ A' _' L: j0 G9 V
你的量有些大，不过多用些力量晃还是能够加速溶解的，至于能不能到1min就溶解了，还要你试试

dongxin

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5 D2 u( [$ ~: Z; u5 y6 e. S& W0 N# N# ^7 J. L( k
的确很冰，我记得当时培训的老师交大家，就是用双手戳几下，然后放入水浴锅中，摇晃起来

免疫与细胞

解冻时摇一摇，温度最好别提高。不用全部解冻，80％~90％就可以了。实在想解冻快就换冻存管，换个大的。

杏色玻璃

水浴锅中加快摇晃速度，融化80%左右就可以拿出来准备加入培养基离心了，不必要等到全部融化。之后自己冻得时候就体积控制在1ml内吧

fm001982

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& o- k& I/ i% P+ C
7 l* s) y& q- O! ~9 y% m) x嗯，确实有道理，但说实话，-180度，很冰啊。单层手套，档不住冰冻的感觉。

dongxin

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6 X) z- s# d. Y3 G# \
1 |' a8 M6 D- b我之前参加过某干细胞库的培训，那里的老师建议取出的冻存管在手心里戳一下，用双手手心（意在去掉表面的霜）。再放到水浴锅里晃动。如果都不行，建议你冻存的液体减到1mL试试。