细胞复苏解冻问题

fm001982

3 Q5 [9 Q/ u* E: T8 U9 F. m0 T& M
谢谢大家的建议，下次我把温度提高到42度，在水浴锅的不同位置晃动试试。
# Z0 d+ u1 H6 \3 `  U7 O4 Y% B! C* t一个小小的步骤，还是有很多细节，经验很重要，水很深啊 。

ccfc

提高温度到42度，大部分融化了留有一个小冰块就可以准备操作了，操作时基本都融化了

yingfeixiang

回复 fm001982 的帖子
* Z+ G9 `% u$ v: s: o3 Y5 b" _
) e, ~5 {1 m# {9 i. l就是在水浴里多晃动

fm001982

回复 dongxin 的帖子* g  }& P9 Z7 F/ q
. q" V# w- n( x7 d
我用的39度，用的手摇动，摇的的力度也不小，出现液体的时间大概在80秒，只要出现液体溶解就很快了，但是就是前边融的时间稍长，还没解决办法。

dongxin

回复 fm001982 的帖子
) T0 i( W1 s! x& d. b7 P
+ Y2 N- x! [* t) |% o$ \9 W: M在37度的水浴里，用镊子夹着不停的晃动，就可以呀。待有一小块小冰晶时消毒转移至超净台中进行下面的操作。供参考

LVXUEYAN1101

不停的晃动解冻就可以了

xieyun20052005

对，一般40度也是么问题的，而且即使一分钟化不完也问题不大，而且下次你可以将细胞密度调整的稍微大一些，

sfnana

可以再提高一点水浴锅的温度，40度，因为你把冻存管放进去，在冻存管周围的水温度会降低，另外在水浴里多晃动一下，冻存的量有点多，1分钟化不完，控制在2分钟-3分钟也是没有问题的，我们试过，不影响，毕竟冻存的体积比较大。还有就是水浴时间久了的话，不必完全化完，还剩豆大的冰碴时就可以拿出来了，等你喷喷酒精，擦拭一下，准备开始实验的时候，就全部化完了，时间刚刚好。

fenlichong

1.5ml冻存液有点多，全溶解的话花的时间也长，建议加大冻存密度，减少每管冻存液添加量。

gxbzjznn

其实我个人认为不必完全融化，可以剩豌豆大小时候就从水浴锅里面拿出来，毕竟你从水浴锅拿出来喷上酒精再擦干再用移液枪洗出来到离心管还需要一些时间。