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[请教] 崩溃,茜素红染色又没有染出来   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2016-11-20 12:26 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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本帖最后由 城墨 于 2016-11-20 12:27 编辑 , H, I0 s6 {3 ]3 o; P) W

& Z- w9 F/ G) j! y/ G: K  H' G2 T第三次染色了,每次成骨诱导都是大半个月时间
4 @( K4 X* T/ `& \2 l# [今天是第三次染色,依旧什么都没有
' C! C* Y( x! ~# d- ?8 G$ `0 z我的做法是,MC3T3-E1细胞,在VC和甘油磷酸盐的成骨诱导下14天。
3 l6 Q5 n1 y* P* _" v做AR染色,先PBS洗细胞,再95%乙醇固定10min,再蒸馏水洗三遍,最后茜素红溶液染色。) A& d# N; j& w/ `" f
问题是茜素红我已经用过很多种了,买来的,索莱宝0.2%的,没染出来;自己配的,sigma粉末,0.1%,PH 8.3,用Tris配的,还是没有;1%,直接用蒸馏水溶解的,依旧很淡。
' \6 c4 U4 ~* R0 r感觉镜下能看到钙结节啊,是不是那种致密透亮的?1 Z9 m8 o& {0 F* F
不知道哪里出了问题啊,我还打算染MSC呢,这个染色一直做不出来,真是让我太烦恼了。
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沙发
发表于 2016-12-16 15:38 |只看该作者
传个图啊

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包包
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金话筒 优秀会员 研讨会精英

藤椅
发表于 2016-12-21 19:33 |只看该作者
用的什么牌子的血清?会不会是时间不够,我去年做的时候,做了17天没有结节,做了26天就结节很多了,,,
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板凳
发表于 2017-1-11 10:09 |只看该作者
本帖最后由 是你啊 于 2017-1-11 10:10 编辑
. Y/ q0 M9 ]9 z* e- E
! T1 f2 v% c" s我也染不出来,求指教。实验太虐心
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小小研究员

报纸
发表于 2017-1-14 22:30 |只看该作者
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