NK扩增遇到的问题，求解

Liyun65

最近在筛选人外周血NK细胞扩增的方法，遇到一些问题。不知道大家养NK细胞种的细胞浓度是多少。; A  C$ E; n3 B) u
目前遇到的问题是：0天分离PBMC，然后加入OKT3、IL2、IL15第4天离心去除OKT3。但是，第4天观察到细胞结团了，却没有增殖，细胞很小，不知道是不是细胞皱缩变小了，还是死了。

moluxingke

看回复有人说纯因子刺激方法不行，但如果用其他细胞做饲养层的话，临床应用岂不是有很大风险？

鑫鑫向荣

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2 v  Y# u" j5 p, H8 [8 z6 k9 ^OKT3应该和IL-2，IL-15不是一起加的，要隔一段时间加入

何如

NK细胞在体外培养会成集落生长,没有增殖可能是刺激不够,不一定就是细胞死了,建议台盼蓝染色计算一下活率.

lihaifeng

回复 鑫鑫向荣 的帖子& g) @% r2 ~0 g; U% s" O* s- D

0 {( a, j* g2 v( Q/ e( {9 T具体的谁都不会说的，都是每个公司辛苦研发的，属于机密。还得靠自己看文献，不断的尝试。

鑫鑫向荣

回复 Liyun65 的帖子0 _% c' G  D- G  q4 N3 ~2 H. a# Q: Z

3 o! m5 s6 N1 j+ r添加CD3对纯度影响很大的，NK前期增值的太慢了。

鑫鑫向荣

回复 lihaifeng 的帖子3 Y) Q( ]; B: i# x, [! y
# v9 z( _4 N# o5 U- @) j! h
怎样可以使NK很快活化并大量增值

wuhuaguo88l

正常，集落会有些半贴壁，过两天就会脱落出来

lihaifeng

第4天没有增殖很正常，你这个体系估计5到7天才会增殖。细胞成团代表他将要增殖，可以再观察几天再说。

liuyanly35

OKT3是养CIK细胞的。不是针对NK细胞的 。