关于T细胞培养扩增

nailute1985

最近培养外周血分离的PBMC扩增T细胞的时候，一开始t细胞生长状态很好，形态也是活化的形态，抱团也比较多。我们就是OKT3刺激之后常规添加IL2，大概48h补加一次，维持密度1*10^6/ml，但是发现细胞总是在D8天左右的时候从活化状态回到那种球状的静息状态，进而开始有细胞凋亡发生，增殖明显受到抑制，撑不过D10左右，细胞就会挂。我感觉应该不是个体差异问题，但是经过lentivirus感染后的T细胞，培养条件不变，生长状态却出奇的好。请问大家有没有遇到T细胞D8天左右凋亡的情况出现？如何解决？谢谢

nailute1985

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nailute1985

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fftian3912

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+ p( J$ K7 N+ j/ t, m大侠，能给个QQ联系方式吗？请教您T细胞培养的问题！谢谢！！！

niliu730323143

回复 niliu730323143 的帖子; w5 l. [9 q3 B% M4 [# A
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CD3和CD28

nailute1985

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; s- z: X/ H- E/ e我们是临床实验，不可能加PHA的

nailute1985

回复 niliu730323143 的帖子0 i7 o) p8 o& a

, j* K1 S- s" S6 U7 l: jOKT3是一个抗体，可以跟TCR-CD3抗原复合物结合，激活T细胞信号通路，只有激活T细胞的信号通路，T细胞表面才会上调IL-2受体，才能跟IL2结合，活化JAK／STAT信号通路，细胞才能增殖。

niliu730323143

回复 nailute1985 的帖子% H! E* w1 W, w" ]: E! z

( v* m7 l: L8 A& r5 V2 C" W一般来说，应该用PHA和IL-2来培养的，或者CD3/CD8加IL-2养的，反正我现在已经一头雾水了。

niliu730323143

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/ e, M2 ]( m, }0 J5 o3 R! T一般来说，应该用PHA和IL-2来培养的，或者CD3/CD8加IL-2养的，反正我现在已经一头雾水了。

niliu730323143

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OKT3刺激有什么作用？