CRISPR- Pro技术建立在传统CRISPR/Cas9技术上,沿用核酸酶介导的基因修饰技术体系,采用独特的受精卵处理方式使受精卵偏好同源重组修复路径,进而提 高同源重组效率。Cas9/gRNA复合物在靶位点进行切割,产生双链断裂(DSB:Double-strand break),迫使细胞进行紧急修复。通常条件下,细胞偏向于使用非同源末端连接(NHEJ:nonhomologous DNA end joining)的方式对断裂的双链进行修复,进而造成靶位点基因的插入/缺失突变。CRISPR-PRO独特的受精卵处理方式,极大地提高了同源重组修 复(HDR:Homology-directed recombination or repair)路径的效率,使得DNA大片段敲入(KI)及条件性敲除(cKO)得以实现。