求推荐神经干细胞培养基或者因子

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求推荐一种神经干细胞培养基，目前实验室用的培养基细胞长势一般，细胞酶解后离心洗涤，用培养基重悬会出现絮状物质，拿枪头吹也吹不散，三天后培养基中会出现絮状物质，絮状物之中有大量神经干细胞球，目前想换一种培养基对照一下，酶解的酶目前是用的TryplE

深海寂寞鱼

1125476931 发表于 2017-1-16 14:47
+ p' ?  D9 u" o3 L求推荐一种神经干细胞培养基，目前实验室用的培养基细胞长势一般，细胞酶解后离心洗涤，用培养基重悬会出现 ...

% s; D* t3 I1 U3 g5 v; q3 h请问你使用胰酶进行细胞消化的吗？* h7 T% s7 y( A3 J7 |
" L) s) n; \5 S' {' v, z6 a( |
就你描述的情况来看，感觉像是消化的稍微有些过，导致有些细胞里的DNA释放出来形成了絮状物质。解决方法有两个：
. e; R, X! K$ Y4 q+ q5 o1 p1. 如果科研经费不成经费，建议考虑换成Accutase进行细胞消化。
5 v$ F2 E" Z! u% K
5 y5 r+ {; R7 C2. 可以考虑在消化液中加入DNA酶（具体浓度我忘记了，你可以查一下资料），这样可以消除絮状物l了。5 I; x; W) C" o* o$ |: j* |
    还有如果是用胰酶消化的话，消化时间不宜太长，消化后吹打不要力量太大。1 x9 t. f1 j, H* {" H1 U
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此外，神经干细胞不是非要通过酶消化法传代，机械吹打也可以用来进行传代，只是单细胞率不会太高。你可以根据你下游实验的需要，来选择传代方式。4 i* H3 ], ]5 \
+ i* F9 D+ q: ]0 F, V
有问题多多交流。

wm阿咪

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& n$ L* b" ^! m& w0 [, _! R我用的accutase。不过也会有絮状物。机械吹打把握不好力度，每次消化后单个细胞总是长不大了，然后就分化了。

wm阿咪

回复 1125476931 的帖子5 k' G2 u' m! ]% S; a% P/ y

2 u- Q! \- x: i: u' S* z用STEM PRO ACCUTASE对细胞伤害会小一些。