求推荐神经干细胞培养基或者因子

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求推荐一种神经干细胞培养基，目前实验室用的培养基细胞长势一般，细胞酶解后离心洗涤，用培养基重悬会出现絮状物质，拿枪头吹也吹不散，三天后培养基中会出现絮状物质，絮状物之中有大量神经干细胞球，目前想换一种培养基对照一下，酶解的酶目前是用的TryplE

深海寂寞鱼

1125476931 发表于 2017-1-16 14:47   y" M. t. H+ K0 \, T7 T
求推荐一种神经干细胞培养基，目前实验室用的培养基细胞长势一般，细胞酶解后离心洗涤，用培养基重悬会出现 ...

7 O8 h# e8 p7 Q/ I请问你使用胰酶进行细胞消化的吗？7 ]' h: f4 m" k# x) {

& @, @! W, n7 Z: f就你描述的情况来看，感觉像是消化的稍微有些过，导致有些细胞里的DNA释放出来形成了絮状物质。解决方法有两个：' X+ U, Z& p+ S, Z1 Z' ^/ u& a
1. 如果科研经费不成经费，建议考虑换成Accutase进行细胞消化。8 {4 J( V: ]5 A" w# g
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2. 可以考虑在消化液中加入DNA酶（具体浓度我忘记了，你可以查一下资料），这样可以消除絮状物l了。2 g  C, G; d6 w- z9 v% \
    还有如果是用胰酶消化的话，消化时间不宜太长，消化后吹打不要力量太大。
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. E3 P5 ^* C7 A! a7 h5 p- E. _此外，神经干细胞不是非要通过酶消化法传代，机械吹打也可以用来进行传代，只是单细胞率不会太高。你可以根据你下游实验的需要，来选择传代方式。, v9 r7 g. w( M3 X4 V0 u9 r

, P+ Q1 k5 }8 L8 ]. |有问题多多交流。

wm阿咪

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我用的accutase。不过也会有絮状物。机械吹打把握不好力度，每次消化后单个细胞总是长不大了，然后就分化了。

wm阿咪

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7 C( j; |. Y; i! [用STEM PRO ACCUTASE对细胞伤害会小一些。