干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 20798|回复: 3
go

求推荐神经干细胞培养基或者因子 [复制链接]

Rank: 1

积分
威望
4  
包包
27  
楼主
发表于 2017-1-16 14:47 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
求推荐一种神经干细胞培养基,目前实验室用的培养基细胞长势一般,细胞酶解后离心洗涤,用培养基重悬会出现絮状物质,拿枪头吹也吹不散,三天后培养基中会出现絮状物质,絮状物之中有大量神经干细胞球,目前想换一种培养基对照一下,酶解的酶目前是用的TryplE
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 4

积分
2227 
威望
2227  
包包
7518  

专家 优秀会员 金话筒 新闻小组成员

沙发
发表于 2017-1-20 00:11 |只看该作者
1125476931 发表于 2017-1-16 14:47 3 `* _5 |9 |. [  j( a4 ^
求推荐一种神经干细胞培养基,目前实验室用的培养基细胞长势一般,细胞酶解后离心洗涤,用培养基重悬会出现 ...

- O5 n# S( G" j( o! W请问你使用胰酶进行细胞消化的吗?
% I+ @! n0 L. \+ e- A' ^$ z6 p  u0 |+ H; \- B, P$ J* d" d
就你描述的情况来看,感觉像是消化的稍微有些过,导致有些细胞里的DNA释放出来形成了絮状物质。解决方法有两个:
9 v! k/ v% w: f  Q1. 如果科研经费不成经费,建议考虑换成Accutase进行细胞消化。) T$ y4 @# |/ @' I9 E' j

/ V1 O- |2 W- Z) C! m1 {5 c2. 可以考虑在消化液中加入DNA酶(具体浓度我忘记了,你可以查一下资料),这样可以消除絮状物l了。
0 L  K" m# R. J' e/ d$ D0 t" ]    还有如果是用胰酶消化的话,消化时间不宜太长,消化后吹打不要力量太大。
  o) s( H1 N7 Z6 w+ c6 I4 V6 Z6 F
此外,神经干细胞不是非要通过酶消化法传代,机械吹打也可以用来进行传代,只是单细胞率不会太高。你可以根据你下游实验的需要,来选择传代方式。
" R7 ~9 Q9 t6 D7 S' W+ e9 s1 r3 L; E
有问题多多交流。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 20 + 30 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 20  包包 + 30   查看全部评分

Rank: 1

积分
威望
3  
包包
11  
藤椅
发表于 2017-3-22 11:04 |只看该作者
回复 深海寂寞鱼 的帖子
# F& _8 h: ]9 V" N$ X  N/ q% t4 \9 Y8 K8 ?2 w
我用的accutase。不过也会有絮状物。机械吹打把握不好力度,每次消化后单个细胞总是长不大了,然后就分化了。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
威望
3  
包包
11  
板凳
发表于 2017-3-22 11:07 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 1125476931 的帖子
2 I4 g' z9 _+ y# M* @' D; o! e- N7 g  p
用STEM PRO ACCUTASE对细胞伤害会小一些。
‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2024-5-2 11:52

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.