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楼主: zpzp0312
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讨论,畸胎瘤制作方法   [复制链接]

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楼主
发表于 2009-6-19 17:40 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
先前通过腹股沟皮下注射ES细胞获得畸胎瘤。* E0 x1 Y! S: q% e8 [/ G
现在想寻求一些获得畸胎瘤的其他方法,希望大家群策群力踊跃发言。
% J: M8 ^& _+ ?最好把详细方法写出来!
5 d  P6 Y; H: ~- |( h! m" v先来个“抛砖引玉”吧~~~* W. V* S5 H5 L6 {- f
1:当ES细胞生长达70%汇集后,1比2传代,培养1天。/ J) n3 y& f" R9 d1 y  J  U
2:离散ES细胞前2小时,换新的培养基。
; G! K7 c; l0 B5 F! M' _. U7 Q4 l3:离散ES细胞,计数。; e3 Z! Q9 h; f; }3 C
4:1500rpm,5min$ m2 J: p; {- @
5:用300ul不含LIF的培养基重悬沉淀。
8 M2 l% g" x; n; L7 e6:双侧腹股沟管各注射150ul(大约100万细胞)细胞悬液。1 h: L1 w1 V' o' A* U
一般1个月后即可发现肿块形成。
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沙发
发表于 2009-6-19 17:41 |显示全部帖子
其他方法希望大家拿出来共享一下啊!

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藤椅
发表于 2009-6-20 19:19 |显示全部帖子
4# linxingxing
" U6 S5 K% Y% f0 e- e% P一般来说最好使用免疫缺陷鼠,因为成功率较高。+ U5 k! r2 }+ Z) k0 x
但如果ES细胞的品系和受体鼠品系同源性较高,同样会较容易地产生畸胎瘤。
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板凳
发表于 2010-3-8 12:27 |显示全部帖子
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大动物应该用免疫缺陷鼠吧,毕竟文献中都是这样说的
( s+ @+ U$ }; ]  j' w无论是大型哺乳动物还是人
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