上海巴斯德所等在丙型肝炎病毒 T 细胞反应研究中取得进展

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上海巴斯德所等在丙型肝炎病毒 T 细胞反应研究中取得进展! J% G7 j, c" O. G1 D8 k  M3 J
来源:上海巴斯德研究所 / 作者: / 2017-02-14
1 d+ p: V4 A2 j2 月 7 日，国际学术期刊 PLoS ONE 在线发表了中国科学院上海巴斯德研究所金侠研究组的最新研究成果，题为 Comprehensive mapping of antigen specific T cell responses in hepatitis C virus infected patients with or without spontaneous viral clearance。该课题由金侠研究组和吉林大学第一医院牛俊奇研究组合作，系统地鉴定了丙型肝炎病毒 1b 亚型（HCV-1b）特异性 T 细胞表位，为后续疫苗开发奠定了基础。
' W' F0 x# y, v+ \: @+ oHCV 感染是全球慢性肝炎的主要病因之一，全球约有 1.8 亿慢性 HCV 感染病例，每年约 50 万人死于 HCV 相关疾病。在我国，HCV 感染率约为 3.2%。HCV 感染人体之后，约 15% 的感染者能不经治疗而自发恢复，约 85% 则转为慢性感染，并在感染后期引起肝硬化、肝癌等严重疾病。目前在中国针对 HCV 感染主要的治疗方式为聚乙二醇干扰素联合利巴韦林，其治愈率只有约 50%。新一代药物 Direct-antiviral agents (DAAs) 虽然能将治愈率提高到 90% 以上，但在中国仍未上市，且价格昂贵，也存在产生耐药的可能。而目前仍未有针对 HCV 的预防性疫苗上市。早期研究发现，在自发恢复的病人体内，HCV 特异性 T 细胞反应更强，更广谱，T 细胞功能更强，记忆性 T 细胞更容易产生。而在慢性感染病人体内，HCV 特异性 T 细胞反应则相对较弱，表现为低水平的白介素 - 2（IL-2）表达、弱细胞增殖能力、高 PD-1 分子表达等。因此，研究人员假设自发恢复的 HCV 感染病人体内的 T 细胞反应将为研究 HCV 保护性免疫提供线索，且 DAA 治疗有可能影响慢性病人体内 HCV 特异性 T 细胞反应。
1 S4 C8 r# f7 v上海巴斯德研究所博士研究生张超在研究员金侠的指导下，在研究员郝沛的帮助下设计并合成了 376 条覆盖 HCV-1b 亚型全长的重叠多肽序列，并在吉林大学第一医院和北京佑安医院收集了 111 例 HCV-1b 感染病例样本，包括 61 例 HCV-1b 慢性感染、24 例 HCV-2a 慢性感染和 26 例自发恢复。基于 IFN-γ ELISPOT 试验对所有样本进行 T 细胞表位鉴定。结果表明，自发恢复病人比慢性感染病人 T 细胞反应更强，更广谱。鉴定出 39 个特异性 T 细胞表位，主要分布在 HCV 的 Core、E1、E2、NS4B、NS5A 区域，且包含了 23 个新表位。进而收集了 22 例 DAA 临床治疗过程中的 HCV-1b 慢性感染病人样本，研究 DAA 治疗过程中 HCV 特异性 T 细胞反应的变化。结果发现尽管 DAA 能够在治疗早期就有效地清除慢性感染病人血液中的病毒，但是并没有导致早期的 HCV 特异性 T 细胞功能的恢复。因此，长期的慢性感染有可能导致了 HCV 特异性 T 细胞反应的耗竭，针对 HCV 感染的尽早治疗是有必要的。& |* j6 }* r7 s3 I
该研究还得到了上海巴斯德所研究员钟劲、吉林大学第一医院涂正坤、华瑞，北京佑安医院陈新月、张永宏的大力协助。该项目在国家科技部 “973”、国家自然科学基金、首都特色临床应用研究和首都卫生发展科研基金、国家自然青年基金等经费的支持下完成。
, n4 F- A- }8 [0 j5 H9 q& s原文：Comprehensive mapping of antigen specific T cell responses in hepatitis C virus infected patients with or without spontaneous viral clearance* k, w- H* R1 m$ z% _9 f: t6 c

8 V0 ^% @2 q1 R7 g# `图：自发恢复病人比慢性感染病人具有更强的特异性 T 细胞反应慢性 HCV 感染（HCC），自发恢复（SPR）。A. 样本 T 细胞反应率；B. 总 T 细胞反应强度；C. T 细胞多肽反应数；D. 各蛋白 T 细胞反应打分。E. 单挑多肽 T 细胞反应平均分数。F. HCV-1b 和 HCV-2a 一致序列相似性比较。3 M$ o8 X* f2 ^