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检测NK表面标志 [复制链接]

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楼主
发表于 2017-2-20 10:24 |只看该作者 |正序浏览 |打印
在检测NK表面标志CD3-CD16+CD56+,用流式细胞仪采用什么检测办法?
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发表于 2017-2-23 10:53 |只看该作者
回复 淘知路遥 的帖子3 v( C/ x* [9 J/ S
% r0 V, s) M/ v% y
讲解很清楚,谢谢您

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发表于 2017-2-23 10:32 |只看该作者
回复 echo 的帖子
1 i5 d3 @& a, [' y# G2 N4 A- q" u2 [* M2 y8 a; Z( ?. F
嗯嗯,理解了,非常感谢

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发表于 2017-2-22 10:27 |只看该作者
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回复 地球外世界 的帖子- c4 D2 Q- z3 x3 q
( ]' D$ _; h4 Z2 ~
抱歉,回复的太简单了,让你误解了。引用抗体说明书的话:NK lymphocytes,identified as CD3- and CD16+ and/or CD56+,have been shown to mediate cytotoxicity against certain tumors and virus-infected cells。, n, x/ h# s, }% w
我们用的商业化的抗体组合,CD16和CD56标记的都是PE,所以分析的时候,只要分析CD3-,PE阳就可以了。不知道这样解释是否能明白。
' A5 O- |+ s* C2 v$ }一般初次的流式检测,我们会设阴性对照、同型对照、单阳对照(每种阳性的都要有)、样本组。后面条件设置好后,只做同型和样本组即可,严格的试验,应该是也有阴性组。
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发表于 2017-2-22 09:40 |只看该作者
回复 地球外世界 的帖子7 s0 J% p3 M' B9 u5 c0 k6 t
7 k6 r6 R8 p3 ^; }
是的,分析顺序是这样的。
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发表于 2017-2-21 16:31 |只看该作者
回复 地球外世界 的帖子' W3 N- r4 D" I- s

* [; s! K- w- f* B买试剂的时候有两种类型的:1、isotype(同型不必每次都做,做几次检测选择一个好的做为模板,以后没有必要再做了,直接在这个模板里新建实验检测)  2、单克隆抗体(这个必须买的,用来检测样品阴阳性的)。2 @7 B) X( h! L9 Z! [% R" R
完整实验的分组是:1、同型管(细胞+所有检测标志物的同型都加在此管里)  2、单阳管(细胞+一个管加一种抗体,检测几个标志物就要几个管)  3、样品管(细胞+所有检测标志物的单克隆抗体都加此管)。
, B, _2 g  |: ]; K' z- O; B有些生产厂家是把CD16CD56是放在一个管里(这样方便检测),也有放在两个管里的。这个有专门培训的,你可以和卖试剂、或者技术支持人询问一下。
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发表于 2017-2-21 16:13 |只看该作者
回复 地球外世界 的帖子! s( e- W  Z8 F/ w0 W5 G! Q! i

0 U* ]* d5 }+ P2 |) v) m9 D) ?是的,保证NK的前提是CD3-,分析数据时培训的技术支持说可以使用门套门的方法
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发表于 2017-2-21 11:07 |只看该作者
回复 小云龙 的帖子% {2 o0 y- X# a: ^4 D
) B  O3 e  v  S" x' l
T细胞CD3+(阳性),NK细胞CD3-(阴性)

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地板
发表于 2017-2-21 11:06 |只看该作者
回复 淘知路遥 的帖子
3 L2 i$ C" ^5 O1 H7 ^$ Y! M5 r* c1 y
检验CD3-CD16+CD56+,应该如何使用同型和对照呢?
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报纸
发表于 2017-2-21 11:05 |只看该作者
回复 echo 的帖子3 ]1 k& t: r  i# X# R$ C

: K% I6 n$ `, c0 d3 N& _) G是不是应该要看CD3-里的CD16+CD56+的比例?也就是CD3-CD16+CD56+,三者是“且”的关系?
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