P1代BMMSC，这个形态有问题吗？

Leo_yihan

这是我全骨髓贴壁法提取的小鼠BMMSC，已经是P1代了，图片是用相差物镜拍的，可以看到细胞密度大的地方融合很厉害，呈扁平状，普通光镜下看不到，需用相差才能看到。这是细胞老化吗？还是分化了？
# r" O& r5 a4 x9 Q( x6 v2 {之前怀疑是支原体污染，已经测过，并没有污染。
* S: w4 c& C8 L" T$ S- `" `感觉是不是因为自己实验室用的血清不行，我们用的是两千多块的国外血清。血清对MSC的影响大吗？
9 h& K8 m( m0 ]# g$ X4 Z7 W3 Y

免疫与细胞

  y5 _4 V7 J, y( j, r9 R" q* V7 Y1 o/ J+ `
回复 Leo_yihan 的帖子
5 H' w, Y2 f# b, E
! K- t7 r1 Q( U" NP1代培养多久了，看着感觉没什么问题，细胞生长就这样，先长的密集，再向外扩散

cuijiaoyan

个别细胞已经变得很宽，说明已经开始老化了，细胞的状态不均一，血清对MSC的生长影响很大，用的胎牛血清吗？不过细胞本身的状态也需要考虑，血清浓度大和细胞接种密度太低均容易使细胞老化，你传一代再看看吧。

Leo_yihan

回复 cuijiaoyan 的帖子
; Q# I/ i* `" N0 X/ m- z; |1 T6 B
用的是10%浓度的胎牛血清。如果添加一些b-FGF老化情况会不会好一些？P0代细胞状态看起来还不错，传过代后就会开始老化。

Leo_yihan

回复 免疫与细胞 的帖子
/ D) ^* \' q7 e9 D- ]0 f. ]0 `5 A! e. i
这是第四天的P1代。请问你的培养基成分是怎样的？我们用的是DMEM/F12+10%FBS+双抗，需要额外添加其他吗？

cuijiaoyan

回复 Leo_yihan 的帖子& D; P6 s5 ~: w" a: m4 ~" p- q9 [( G
+ J! V$ |1 g$ E% x3 _! c
你传代的细胞密度是多大？这么快老化也太快了些,还有一个原因可能是你的这个样本细胞本身状态不行，你先传代这个样本的细胞，还是继续老化的话换个样本试试。