关于间充质干细胞换液的问题

hy12

各位大神，请教一个小问题，我最近在培养间充质干细胞，换液时间定的是3天一换，但实际上三天时培养基并没有变黄，是不是可以根据实际情况调整换液时间呢？对细胞有没有影响？; l# x" Q8 Q* Z' v
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还有一个问题就是我的细胞换液后明显贴壁细胞少了，是什么原因呢，不至于是脱落吧，可能是回缩，希望大家能给我一些意见，非常感谢！

快乐男孩

建议上图，贴壁的少了是飘起来了吗，

爱学习的青年

是不是消化过度死掉了？还有换液确实根据实际情况换液，培养基变黄换液或者细胞生长到一定程度传代

cuijiaoyan

1、是有细胞死掉了吧，MSC死掉了才会飘起来啊，建议上图看看细胞状态和密度。, J5 T2 z$ K" E- J
2、还有可以根据细胞生长状况调整换液时间，但是要每天观察细胞状态，防止细胞营养不良，细胞营养不良会导致细胞生长变慢，细胞变宽，老化。理论上是要3天换液的，有时候根据培养基的颜色判断消耗并不准。

wangddk

应该对制备培养的这个整个过程进行必要的工艺验证，经过了验证才能确认你制定的每个流程是不是都是适合的，符合你们自己所需的，验证之后还能对工艺进行优化，这些培养的时间都是验证的重要参数。

晗晗

1.当然可以根据细胞生长状况换液，并不是确定的三天. z1 y, p# L3 N% V: {; i  S
2.细胞是飘起来的吗？可能是胰酶消化时间太长了，给消化掉了，还有可能是贴壁没贴牢靠

flylover1221

首先，要确定楼主培养的是原代细胞还是传代培养的细胞株；
' w9 `2 `7 m  O如果是原代培养，培养基颜色变化不明显，可以进行半量换液或者补液；5 I% H9 d% {- q$ k; |  @' p
如果是传代培养，培养基颜色变化不明显，可以适当延长换液间隔；( I/ F6 m  x" _7 u6 S/ X4 x1 C
此外，换液动作轻轻加入，吸管顶端不接触培养表明的情况下，已经贴壁的细胞是不容易被洗脱的，可否上图，或者考虑是否被污染了。

阿秀哥

最好还是按照实际情况换液吧，毕竟不是每份细胞的生长状态都一样的，都会存在差异性。至于换液后贴壁细胞少了，会不会是因为细胞死了