我养的NK第6天正常，第7天扩瓶后就不正常了，请教各位大神问题出现在什么地方？

yanyueying

我养的NK第6天正常，第7天扩瓶后就不正常了，请教各位大神问题出现在什么地方？

阿秀哥

楼主，看着你的细胞确实是有问题啊，第6天有那么多细胞团，怎么到了第8天就没什么细胞团了呢。有可能是污染了，楼主有做了相关的检测了吗

剡溪兰客

是哦，前期挺好啊？培养基回温吗？加培养基多吗？
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yangzeqian

具体请列出来一下，D6-D8的操作过程。

yanyueying

回复 阿秀哥 的帖子  r$ u, l+ }' ~$ I6 T
# }7 Q( C5 U; O: c; O& U
还没有做相关的检测，从镜下观察不像是细菌污染啊！

yanyueying

回复 剡溪兰客 的帖子* g5 a/ b6 R3 Q; X0 u7 w, R
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培养基没有回温，第6天的时候，细胞悬液的体积是600ml，补加了600ml的培养基，一下子就变成这样了，无语了

yanyueying

回复 yangzeqian 的帖子0 J/ X; h( a0 l& h, u9 L: B: |

8 K- c1 C1 [& HD6天的时候，观察培养基有点变黄，就补加了600ml培养

阿秀哥

回复 yanyueying 的帖子9 f/ o+ _7 {+ k5 O" q. Z/ C& N3 W

! j4 r0 g7 }. ~( Z: U从你的图片来看是不像细菌污染，但是不排除是其他污染，比如支原体。建议做个全面的检测吧

yanyueying

回复 阿秀哥 的帖子
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- [) ]% h& \7 x8 h5 M好的，非常感谢

jinyangtang

这个问题有一个可能就是你培养基加多了，不知道你第六天的细胞密度有多少，你直接加了600ml培养基，会导致细胞密度过低，在细胞培养中，密度过高或过低都会影响细胞生长。