我养的NK第6天正常，第7天扩瓶后就不正常了，请教各位大神问题出现在什么地方？

yanyueying

我养的NK第6天正常，第7天扩瓶后就不正常了，请教各位大神问题出现在什么地方？

阿秀哥

楼主，看着你的细胞确实是有问题啊，第6天有那么多细胞团，怎么到了第8天就没什么细胞团了呢。有可能是污染了，楼主有做了相关的检测了吗

剡溪兰客

是哦，前期挺好啊？培养基回温吗？加培养基多吗？
8 r) O! o3 p$ s7 v* x

yangzeqian

具体请列出来一下，D6-D8的操作过程。

yanyueying

回复 阿秀哥 的帖子2 A1 P- ~& I  P( u' p) j
9 O1 i& ~$ `7 b1 P9 D6 y) v. d
还没有做相关的检测，从镜下观察不像是细菌污染啊！

yanyueying

回复 剡溪兰客 的帖子2 [/ z- J) \4 X1 G2 @9 R/ N& @

+ L1 O  z( p7 f( G0 t1 X培养基没有回温，第6天的时候，细胞悬液的体积是600ml，补加了600ml的培养基，一下子就变成这样了，无语了

yanyueying

回复 yangzeqian 的帖子
- D& b9 Z4 d8 M7 w$ ]6 }
* P: x8 `6 y6 [( I* ZD6天的时候，观察培养基有点变黄，就补加了600ml培养

阿秀哥

回复 yanyueying 的帖子/ G3 t, K% T" ?& v- M0 h' z: `

7 B8 a# @% q/ I! Y& C4 Q4 |从你的图片来看是不像细菌污染，但是不排除是其他污染，比如支原体。建议做个全面的检测吧

yanyueying

回复 阿秀哥 的帖子
$ U, Q0 J! g/ n2 O3 C
6 _* F2 y# O0 t+ l* Y6 c- W, t6 A好的，非常感谢

jinyangtang

这个问题有一个可能就是你培养基加多了，不知道你第六天的细胞密度有多少，你直接加了600ml培养基，会导致细胞密度过低，在细胞培养中，密度过高或过低都会影响细胞生长。