我养的NK第6天正常，第7天扩瓶后就不正常了，请教各位大神问题出现在什么地方？

yanyueying

我养的NK第6天正常，第7天扩瓶后就不正常了，请教各位大神问题出现在什么地方？

阿秀哥

楼主，看着你的细胞确实是有问题啊，第6天有那么多细胞团，怎么到了第8天就没什么细胞团了呢。有可能是污染了，楼主有做了相关的检测了吗

剡溪兰客

是哦，前期挺好啊？培养基回温吗？加培养基多吗？) i* d8 l! @! \: N+ ?, \7 u

yangzeqian

具体请列出来一下，D6-D8的操作过程。

yanyueying

回复 阿秀哥 的帖子
1 K: t! p; ?$ n, ?# }7 N- q
' _- B9 m. T  V/ l. @还没有做相关的检测，从镜下观察不像是细菌污染啊！

yanyueying

回复 剡溪兰客 的帖子, b; s1 i0 ]7 p8 o6 ?- U! C

5 S$ R' D0 Z( _" r9 @6 b培养基没有回温，第6天的时候，细胞悬液的体积是600ml，补加了600ml的培养基，一下子就变成这样了，无语了

yanyueying

回复 yangzeqian 的帖子! a2 |* b' x' i/ ~

6 T; l  I4 {% X. X. ~D6天的时候，观察培养基有点变黄，就补加了600ml培养

阿秀哥

回复 yanyueying 的帖子
) J! t7 ]2 R! X9 B% c( K- o' i
6 y" D  Q/ n/ ~- o+ W: _1 G从你的图片来看是不像细菌污染，但是不排除是其他污染，比如支原体。建议做个全面的检测吧

yanyueying

回复 阿秀哥 的帖子5 g) d* I, w$ i

% E/ ]) |/ w" B# D好的，非常感谢

jinyangtang

这个问题有一个可能就是你培养基加多了，不知道你第六天的细胞密度有多少，你直接加了600ml培养基，会导致细胞密度过低，在细胞培养中，密度过高或过低都会影响细胞生长。