关于间充质干细胞的贴壁问题

choudongxi1015

各位同仁，最近发现几个问题想请大家赐教：9 u% S. s' Z# A. |
（1）MSC在培养的时候P0代较P1带的贴壁能力要强很多，不容易消化下来，我想问一下可能的原因是什么？是因为MSC细胞的纯度吗？0 f. l3 T9 {, ?7 {
（2）在进行小鼠BMMSC培养时，P0代细胞往往长势很慢，且数量较少，想问一下什么原因？
/ S& q  n: I( k# E3 Y0 ~' s/ @: _（3）上传一张图片，是小鼠胫骨的P0代，很难消化下来，感觉细胞形态也不太对的感觉，请大家分析一下。感谢

jifengtang

P0代本身就比P1至Pn难消化，这是原代培养的特性。细胞形态还可以，可见明显集落形成单。P0代细胞较少、生长速度慢都是原代培养的特性，可适当提高接种密度，加长消化时间。

choudongxi1015

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但是消化时间太长，对细胞的活性是有影响的，传代下去很难长，而且P0代的这个特性是什么原因呢？

剡溪兰客

你这图应该是比较纯的细胞，P0本来就贴一些

choudongxi1015

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那原因是什么？ 是因为可能P0中还含有其他类型的细胞，导致纯度不太够，或者说难消化下来的是不是不属于间充质范畴？

shangshiwang

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; k* J  r* l, G8 y7 W, O8 L6 x# Y我分出来的BMSC跟你的一模一样，P0确实比较难消化下来，不知道是什么原因，P1代的细胞老化现象很严重，根本没办法做实验。不知道你的怎么样，可否交流一下。

孤独山石

不好消化下来的就不要了 会导致细胞不纯。P1带不要种的太稀，生长时间长细胞会老化分化。

shangshiwang

孤独山石 发表于 2017-10-17 09:17 " i" u! A8 i+ F
不好消化下来的就不要了 会导致细胞不纯。P1带不要种的太稀，生长时间长细胞会老化分化。

6 L$ B4 ]- ]* \: c5 i6 N我已经控制传代密度和消化时间了，传代后的细胞还是老化了，不知道有木有相关的应对经验可以分享一下，感激不尽。

kiss2346

P0细胞不好消化可以考虑增大胰蛋白酶的浓度 ，不建议增加消化时间，另外P0细胞纯度还不错，传代后建议增大细胞密度