请教诱导中遇到的一些问题

jrfeng

最近做诱导碰到了以下几个问题：
* T8 j: a/ w+ h; z! i  Q( j1.诱导D6天准备上feeder时发现在24孔板中细胞边缘卷起。（是否是因为细胞密度过大，产生复层化？）
$ b8 a" Z) G  t) D0 x* b0 X2.D6天上feeder时，使用200ul 0.05%胰酶消化3min，800ul培养基终止消化，将细胞吹散，但是在吹的过程中发现细胞黏糊糊的吹不开，无法吹成单细胞悬液，不知道是出现了什么问题。) b+ m4 j  `2 e) |$ M$ j& b
3.如果使用10cm dish诱导的话，seed 150万-200万的细胞是否合适？OSKM的病毒加多少比较合适？6-8ml可以么。0 H/ e" c; {9 `( c! s
请大家指导，多谢~~{:2_31:}

gondobar

1.边缘卷起一般是细胞长过了
, t9 n7 C5 `7 b7 _2.黏糊吹不开的细胞团一般是死细胞

jrfeng

回复 gondobar 的帖子( L- I1 S9 @& u$ w  ]
  J* g, X" S1 Y* e! X+ H
谢谢~:loveliness:这次做的还比较顺利

jrfeng

好的