请教诱导中遇到的一些问题

jrfeng

最近做诱导碰到了以下几个问题：6 O( f7 N/ M1 _+ W# u+ D* |
1.诱导D6天准备上feeder时发现在24孔板中细胞边缘卷起。（是否是因为细胞密度过大，产生复层化？）
2 n# z5 _' f7 Y; w0 c6 R2.D6天上feeder时，使用200ul 0.05%胰酶消化3min，800ul培养基终止消化，将细胞吹散，但是在吹的过程中发现细胞黏糊糊的吹不开，无法吹成单细胞悬液，不知道是出现了什么问题。' @% w) m/ E7 s6 x
3.如果使用10cm dish诱导的话，seed 150万-200万的细胞是否合适？OSKM的病毒加多少比较合适？6-8ml可以么。
4 f# Q3 P" `+ W' A/ V请大家指导，多谢~~{:2_31:}

gondobar

1.边缘卷起一般是细胞长过了! E6 h+ Q2 D6 Y
2.黏糊吹不开的细胞团一般是死细胞

jrfeng

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/ z9 m6 C: |+ P1 B. c
. I1 M, B$ c* H+ v/ q谢谢~:loveliness:这次做的还比较顺利

jrfeng

好的