请教诱导中遇到的一些问题

jrfeng

最近做诱导碰到了以下几个问题：
; w/ z" N$ P" {. m$ F1 m9 X1.诱导D6天准备上feeder时发现在24孔板中细胞边缘卷起。（是否是因为细胞密度过大，产生复层化？）" H( [& H% d; n' L( F+ [" n
2.D6天上feeder时，使用200ul 0.05%胰酶消化3min，800ul培养基终止消化，将细胞吹散，但是在吹的过程中发现细胞黏糊糊的吹不开，无法吹成单细胞悬液，不知道是出现了什么问题。" k2 N3 g8 w! R' e4 J! v
3.如果使用10cm dish诱导的话，seed 150万-200万的细胞是否合适？OSKM的病毒加多少比较合适？6-8ml可以么。
" ?( i+ i& X1 z请大家指导，多谢~~{:2_31:}

gondobar

1.边缘卷起一般是细胞长过了
- y  c6 }! Y# f2 E. B+ I7 H) G% }2.黏糊吹不开的细胞团一般是死细胞

jrfeng

回复 gondobar 的帖子' G) A6 T0 H& Q. X# d: Z

) ]! n/ {6 w' E' d! G$ C- F# L谢谢~:loveliness:这次做的还比较顺利

jrfeng

好的