请教诱导中遇到的一些问题

jrfeng

最近做诱导碰到了以下几个问题：
! y& W3 u, f3 g3 ~1.诱导D6天准备上feeder时发现在24孔板中细胞边缘卷起。（是否是因为细胞密度过大，产生复层化？）
, }* S* r+ K  I: q2.D6天上feeder时，使用200ul 0.05%胰酶消化3min，800ul培养基终止消化，将细胞吹散，但是在吹的过程中发现细胞黏糊糊的吹不开，无法吹成单细胞悬液，不知道是出现了什么问题。
5 x9 G4 G  \+ @& O; {- F' q3.如果使用10cm dish诱导的话，seed 150万-200万的细胞是否合适？OSKM的病毒加多少比较合适？6-8ml可以么。! V  D1 J6 V% w7 ~8 ]
请大家指导，多谢~~{:2_31:}

gondobar

1.边缘卷起一般是细胞长过了: U! h9 [- x3 S: v
2.黏糊吹不开的细胞团一般是死细胞

jrfeng

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# H7 W  C1 G2 C* W# ~
3 Q9 Y& r* P! m谢谢~:loveliness:这次做的还比较顺利

jrfeng

好的