间充质干细胞诱导成软骨用番红O染色的图拍片

honey棉花

用gibco的诱导分化培养基诱导间充质干细胞分化成软骨细胞，诱导21天后，用番红O染色，所有的细胞都染成鲜红色。说明书上推荐使用番红O染色检测，但是番红O可以染色所有的细胞核，又可以用于鉴定软骨细胞，请问其原理是什么？( e" i) C+ S" A  E& S# I" G9 }
图中所染色的红色细胞核能说明成骨诱导成软骨细胞吗？

qiqishichaoren

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培养表面需明胶包被过

luoziwei

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0 B& Y* g, x$ M" s0 L( d
至于平板培养的细胞为何会缩，原因太多。建议你拍照来分析

luoziwei

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6 K& D, ^! ^: ^软骨分化的诱导实验建议用离心管培养pellet。就是把细胞悬液放离心管离心，直接换300ml诱导培养基，每两天更换一半新的培养基

honey棉花

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; r* @- |$ U& X3 H
1 q* E/ n0 ?" ]8 G1 @7 ^/ l# A换液的时候都挺小心的，不会去冲细胞团。换完液观察时，细胞团还在，培养几天后就已经脱离了板底。我们最近养细胞都会这样，细胞稍微长过一点就会出现成片皱缩脱离板底的情况，不知这个可有办法解决？

luoziwei

回复 honey棉花 的帖子( ?1 l' l" l+ |6 z

  e* y* N* t% b* r细胞团找不到就有可能在换培养液被冲掉了。番红O染色不能作为MSC软骨分化的key marker，关键还是collagen II。成纤维细胞的胞外基质也能吸附番红O染料

honey棉花

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1 q( Q( i+ N$ j9 M$ J! _2 V  u4 {做了平面培养和微团培养，但是为图案培养细胞密度大很容易造成细胞脱离培养板的情况，诱导第4天微团就脱离了，根本检测不到
# @6 ?. I# V& ^# Y& G0 c' Y" L; J番红O燃料是说明书推荐使用的，做空白对照液发现了所有细胞都能染色

luoziwei

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0 B* L" ^* t+ h# ?3 M8 B+ l
本文上半部分说到MSC体外诱导软骨分化的protocol
6 i: m3 s* ~: P4 ]

小飞雪2300

回复 luoziwei 的帖子) J  C7 G6 U+ b9 M: v: M5 W

5 c/ X5 j7 }8 m$ r7 ?7 ~$ p能有相关的知识分享吗？谢谢！

niliu730323143

能否告知下hMSC细胞分选流程？