间充质干细胞诱导成软骨用番红O染色的图拍片

honey棉花

用gibco的诱导分化培养基诱导间充质干细胞分化成软骨细胞，诱导21天后，用番红O染色，所有的细胞都染成鲜红色。说明书上推荐使用番红O染色检测，但是番红O可以染色所有的细胞核，又可以用于鉴定软骨细胞，请问其原理是什么？" v& o# U5 ~/ z
图中所染色的红色细胞核能说明成骨诱导成软骨细胞吗？

honey棉花

, Z( I$ g3 t& W/ V/ Q
% b/ H. u% d& F0 _0 ]$ f1 G  _
  放大100倍的图片

honey棉花

. e- P# i1 m, p# [

, u1 ]. U6 N9 [* `( T( {7 {6 j      放大200倍的图片

baby00000003

成软骨不是要用U底96孔板离心成致密的小细胞球再诱导么？8 g* ?3 H' A  l4 _& W+ v
而且印象里是要用toluidin blue染色.....

luoziwei

这张照片说明不了什么的。首先，软骨诱导实验不是要球状培养吗？其次，即便你是平板培养诱导，拍照的相差显微镜也不对，要看清细胞才能说明问题。而且，能不能说明是软骨细胞的key marker 是Collagen II，safarin O只是胞外基质染料，一般的成纤维细胞的胞外基质都能吸附一点染料，所以说明不了问题。希望对你有用

niliu730323143

能否告知下hMSC细胞分选流程？

小飞雪2300

回复 luoziwei 的帖子+ O) r& n0 |5 \  z% z. S
4 y9 M6 O  n5 f0 _
能有相关的知识分享吗？谢谢！

luoziwei

回复 小飞雪2300 的帖子
" w5 X9 E9 `: A2 j! _
: a! F5 ~. z8 o- O3 w+ P; x本文上半部分说到MSC体外诱导软骨分化的protocol
* D, |( `/ H( A6 r4 D) n

honey棉花

回复 luoziwei 的帖子' V8 j1 R! K. e2 S
4 [% i! L2 G; d; R: M4 @0 ^! X
做了平面培养和微团培养，但是为图案培养细胞密度大很容易造成细胞脱离培养板的情况，诱导第4天微团就脱离了，根本检测不到
* b5 h1 ]3 ^* G; l番红O燃料是说明书推荐使用的，做空白对照液发现了所有细胞都能染色

luoziwei

回复 honey棉花 的帖子
/ @* j3 r: T8 y) w+ d1 f9 v- K- D. {" P) \0 m4 O: G% z
细胞团找不到就有可能在换培养液被冲掉了。番红O染色不能作为MSC软骨分化的key marker，关键还是collagen II。成纤维细胞的胞外基质也能吸附番红O染料