脐带间充质干细胞酶消化相关问题讨论

小飞雪2300

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请问，分离脐带间充质干细胞，消化华通胶用什么酶消化最好？一般消化多长时间？用胰酶或胶原酶消化后液体很粘稠，如何处理？离心时根本没有细胞被离下来，你们如何离心？请问用酶消化华通胶的大神，你们都是怎么处理的？谢谢

qinchuanniu

分离MSC完全可不用胰酶或胶原酶，直接用组织块贴壁法即可，脐带组织块贴在平皿表面，加少量培养液保持组织块湿润，放二氧化碳培养箱过夜，次日加入培养液，持续培养直到有MSC细胞从组织块边缘爬出，待MSC细胞形成均匀单层后去掉组织块。

qinchuanniu

分离MSC完全可不用胰酶或胶原酶，直接用组织块贴壁法即可，脐带组织块贴在平皿表面，加少量培养液保持组织块湿润，放二氧化碳培养箱过夜，次日加入培养液，持续培养直到有MSC细胞从组织块边缘爬出，待MSC细胞形成均匀单层后去掉组织块。

理科小文艺

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请教：您这样的培养方法，通常几天可以爬出细胞，几天可以收细胞？

理科小文艺

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我们也是用的组织块贴壁培养法，但细胞爬出的速度比较慢，一般7d左右才有细胞爬出。见仁见智。

淘知路遥

还要加个透明质酸酶

rzghc

胰酶换成透明质酸酶，离心的时候加大稀释倍数

wuhuaguo88l

酶消化和组织块都可以，各有优缺点，这方面的文献很多。

伊诺强

酶消化的方法就是成本高，消化时间长，消化时间不好控制。但是细胞爬出速度比帖壁法大大提高。建议使用胶原酶消化，脐带去皮去血管，华通氏胶剪成小块。37摄氏度摇床消化，待几乎所有组织块将近消化完时，离心，培养基重悬细胞，培养。消化后如果太粘稠，考虑是华通氏胶放的太多。或者加入少量DNA酶，会明显缓解。个人用过的方法，希望能够帮到你

qinchuanniu

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' o( B  a  x) E1 X. b7-15天