我培养的小鼠ES细胞出现图中的情况，不知是怎么回事？

yyn2004

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求教高手4 G! ^+ m2 [1 l6 Q
我培养的小鼠ES细胞出现图中的情况，不知是怎么回事？有没有和我一样既进出细胞培养室也进出动物房的的朋友，出现这种情况？谢谢！
0 {. _, Z' U, Y, u问题详细描述：ES细胞是别人传给的好好的ES，但传给我之后，经我养2代之后，状态就不好，具体表现是feeder上有很多褐色的点点，类似于细胞碎片的东西粘在feeeder和ES克隆上，消化后铺在gelatin处理的平板上就出现图中的样子，但feeder在穿上ES之前状态是很好的，和同实验室的同学做了平行实验，操作和用的东西都是一样的，就我有这个问题，不知道到底是怎么回事，请高手们指教！3 u7 q& q3 W! i7 [+ D: m

zpzp0312

你应该把问题描述一下! ~8 ?4 e- Z& y
单从图片看只能感觉饲养层比较稀
2 ~- {: p+ T& M" G( X9 k* Y: Z. M5 n另外上面的圆形是不是集落啊？
  T. C, y) K8 h' b5 o( @! s4 @看不出来

have-a-rest

如果铺明胶或者其他胞外基质的话，应该是胞外基质形成的凝块。也许是处理温度的的影响造成的。丢了重新做。

yyn2004

问题详细描述：ES细胞是别人传给的好好的ES，但传给我之后，经我养2代之后，状态就不好，具体表现是feeder上有很多褐色的点点，类似于细胞碎片的东西粘在feeeder和ES克隆上，消化后铺在gelatin处理的平板上就出现图中的样子，但feeder在穿上ES之前状态是很好的，和同实验室的同学做了平行实验，操作和用的东西都是一样的，就我有这个问题，不知道到底是怎么回事，请高手们指教！

yyn2004

上面的圆形ES克隆

have-a-rest

不妨跟着别人做一遍，或者自己做，别人监督真个过程，看看会否发现问题。
* T) _" u9 [& B2 p) ?3 x  f# T去动物房和进细胞间要严格区分工作服，防护用品等。

zpzp0312

会不会是干细胞培养基的问题啊？" E8 |6 _) H$ w- Z" f
我们在使用M2时，有时也会看到液体里有小颗粒状物质，但倒是没发现影响
. P! L3 e+ f, i6 B对于干细胞培养来说，未发现上述情况。: f- r3 }$ R- {: N- \$ Q0 \9 x
建议操作时细心认真，避免污染！

细胞海洋

很有学习价值

xyzengh

首先你的feeder细胞状态很不好，其次高度怀疑你的细胞有支原体感染，如果是的话非常麻烦。

robort45

9# xyzengh
' ^, ^; Z) E5 u9 m  Y/ W; z) ]- D$ l: O9 _- L
" x: j8 [' J' U; r( z0 \! c
非常怀疑你的细胞被污染了，建议做个革兰氏染色