机械法传代如何更好的将干细胞团块弄碎

随风的天使

我做的是牛的胚胎干细胞，我采用机械法传代，但总是团块很大，请问各位高手机械法传代如何更好的将干细胞团块弄碎？

随风的天使

是的，在小鼠和人上干细胞传代都是用胰酶消化的，但是牛这种大的动物比较特殊，用胰酶消化容易分化，所以尽量采用机械法分离和传代。我曾经试着用胰酶消化传代过，效果不好，所以现在总是机械法传代，但是感觉块太大了。不知道有没有好的办法弄得块小点。

随风的天使

我每次传代时总是用口吸管的针将团块弄碎（团块大小不一），然后将团块传代，因为团块大小不一所以传代的克隆也是大大小小，总是出现不了在人和小鼠上那么漂亮的克隆。牛的培养液的确是没有很确定的体系，我现在也是在慢慢寻找合适的因子，保持它的未分化状态。如果用刀片切割是美容手术刀吗？非常感谢！

随风的天使

非常感谢，我每次使用口吸管拉成很细的针，也许是我的技术问题，撕成的团块很不均匀。我试试您的办法！

随风的天使

非常感谢！这几种酶文献中提到过，都有促分化的功能，我只做过用胰酶的，效果不好，还是只能是机械法传代。

随风的天使

12# xionghao508 , p0 Q+ E5 S) g* H& E) l

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好的，谢谢您

随风的天使

11# yaner 0 L- s( u0 Z! j" S

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- `* H+ J0 G8 u& J% M. X- B好的我回尝试，非常感谢

随风的天使

其实在做的的时候将克隆弄起来挺容易的，就是克隆的团块很紧密，很难弄碎，我回尝试您的办法。谢谢

随风的天使

18# maxiaorongqp & B3 S" \1 m/ V; }+ R1 X

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) z" v$ ?7 i6 I! U! d$ ]" P/ m7 E谢谢，这个主意不错，我回尝试。

随风的天使

19# xionghao508 6 M. S9 q. w8 o3 v2 m8 x' P- u" j

1 P! [: ]4 L5 {' a# F6 o5 D: L
5 ]( w" `& f0 G% ^/ ~非常感谢提醒