第七天（8月21日）上午，观察GFP表达情况

泡沫清风

接种质粒后24小时，观察GFP表达情况：
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0 m+ c7 z% m. S' m- ~" l4 K0 b
8# maz_2008
$ D! `3 `8 b3 m* z+ Q. N你的这句话好像不太对。我也是用脂质体来转染载体的。病毒本身不是载体。病毒是由三个或四个载体包装而成的。（一般逆转录病毒是三个载体系统，慢病毒是四载体系统）
- h# M: C* x, \: u* L& {) D只不过不同的是一般所谓的脂质体转染是转染单载体，直接转染到目的细胞。这样只能做到瞬时转染。* p% `( g! J5 f+ q) K
而病毒包装是把三个或四个质粒一起转染到包装细胞系，生产病毒，再感染目的细胞。DNA能整合到基因组中，能得到稳定转染的产物。当然这要筛选过。
; c" Q8 _+ Q) H+ x, s& x3 U$ q我就是在一般的超净台做的，不过最近做的有点虚，所以我强烈建议老板买了安全柜。虽然我们包装形成的病毒并不是活病毒，但是我觉得还是有点危险性的。特别是他的胞膜蛋白是泛嗜性的时候，所谓的泛噬性一般就是只所有物种都能感染的。比如我用的VSVG就是这类。所以凡事沾过病毒的器械和耗材都要在消毒液中浸泡过或高压过。而且做慢病毒应该比逆转录病毒更加注意。因为逆转录病毒只能感染增殖期的细胞，而慢病毒也能感染非增值的细胞。

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12# hcskrc 7 X  ~7 D* \+ M$ |
你竟然问我是什么细胞！你来这个板块都不知道是什么细胞吗？8 B- S% g7 x! {: h! }
我都贴了40倍的照片，已经最大了。
' l5 Q/ O9 Z6 }4 [包装病毒都48小时了，期间没有换液，有细胞碎片是很正常的。: G. ?0 q' O5 f/ @# I; ]- k) ^) X5 E
你要看正常的，看其他帖子，你再去看看脏不脏？) w8 p. g8 k4 m3 M8 A% `1 N+ m2 C
提问题前请自己先看看清楚

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27# maz_2008 , |. B- s' b: b* `6 M
慢病毒载体是质粒。。。
! l+ L+ u* q/ h% X质粒用TE或水溶，直接放-20℃就行了

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回复 57# mmssyyee
' Q3 ]6 w6 G% ^9 y* e看载体！不同的载体不同，用lipo2000的话，一般80%应该没问题