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本帖最后由 泡沫清风 于 2009-8-22 10:50 编辑 9 T. _/ F0 X+ Z
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8# maz_2008
2 j: H5 B, l; b7 |2 R你的这句话好像不太对。我也是用脂质体来转染载体的。病毒本身不是载体。病毒是由三个或四个载体包装而成的。(一般逆转录病毒是三个载体系统,慢病毒是四载体系统)' y- p5 f) w: o1 B: U8 Y
只不过不同的是一般所谓的脂质体转染是转染单载体,直接转染到目的细胞。这样只能做到瞬时转染。
0 t/ X+ }, x( q7 V! e& r而病毒包装是把三个或四个质粒一起转染到包装细胞系,生产病毒,再感染目的细胞。DNA能整合到基因组中,能得到稳定转染的产物。当然这要筛选过。
! k% k% y/ }( g我就是在一般的超净台做的,不过最近做的有点虚,所以我强烈建议老板买了安全柜。虽然我们包装形成的病毒并不是活病毒,但是我觉得还是有点危险性的。特别是他的胞膜蛋白是泛嗜性的时候,所谓的泛噬性一般就是只所有物种都能感染的。比如我用的VSVG就是这类。所以凡事沾过病毒的器械和耗材都要在消毒液中浸泡过或高压过。而且做慢病毒应该比逆转录病毒更加注意。因为逆转录病毒只能感染增殖期的细胞,而慢病毒也能感染非增值的细胞。 |
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