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本帖最后由 泡沫清风 于 2009-8-22 11:01 编辑
6 i$ Z0 M4 ?3 C6 f1 a1 M5 q! c5 U* N# y/ [
接种质粒48小时,观察细胞并收集病毒:5 `0 a# J) T* U
; J g/ [9 X# P4 C+ @: r* Q& D' ~1 k
2 q/ S! t' @* M% x: R Q& B) B
( |, l& X2 g H7 i应该说我的细胞状态还是不错的。一般我48小时收一次病毒,如果细胞状态好,72小时再收一次,当然病毒滴度肯定没有48小时的高。
# f) {. G8 F5 D; ^' l% m4 c5 U. _) P$ g# n+ |/ ^% G1 c9 U' v: J
收集时,一般可以先2000转离心,再用0.45um的滤器过滤。不过我直接用0.45um过滤,省事。呵呵
6 U3 ^- J6 A# _4 Y过滤完病毒上清可以先浓缩。50000g,4℃离心2h。但我一般不浓缩。
1 N8 _8 l4 \% B% a1 S& R如果在2、3天之内要用这批病毒可以放在4℃,如要要在以后用,就分装保存于-80℃。一般冻存一次滴度降1/3到1/2。 |
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