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第八天(8月22日),观察细胞,收集病毒上清     [复制链接]

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楼主
发表于 2009-8-22 10:53 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 泡沫清风 于 2009-8-22 11:01 编辑 * j7 h+ d, [8 M
. a5 x' w6 j# G, X; j; N$ V- q
接种质粒48小时,观察细胞并收集病毒:
6 w- ^7 v" p/ M% G( ~1 j2 q* p8 T( |) x8 k7 b& [" W
游客,如果你要查看本帖隐藏内容请回复
- [: p+ e- [/ f5 i6 F4 _
8 Y; d6 q: O/ |  @0 p* ^0 M
应该说我的细胞状态还是不错的。一般我48小时收一次病毒,如果细胞状态好,72小时再收一次,当然病毒滴度肯定没有48小时的高。
+ {4 @" J! c( S/ t
+ Z# Z) f/ o; O2 h收集时,一般可以先2000转离心,再用0.45um的滤器过滤。不过我直接用0.45um过滤,省事。呵呵
% E6 f! }- m8 K% k. ?过滤完病毒上清可以先浓缩。50000g,4℃离心2h。但我一般不浓缩。
8 o5 E0 _9 p: a+ g* |; D: P( W如果在2、3天之内要用这批病毒可以放在4℃,如要要在以后用,就分装保存于-80℃。一般冻存一次滴度降1/3到1/2。
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沙发
发表于 2009-8-22 11:02 |显示全部帖子
谢谢大家关注了,我的任务就完成到这里啦。希望大家满意。

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藤椅
发表于 2010-9-1 12:07 |显示全部帖子
回复 128# 军医 ( z8 m+ k1 |; \) ?

) r$ P) y- b% N* W$ e+ M+ o细胞在产病毒的时候并不怎么增殖8 P0 J& D( [3 U$ }6 {
如果你的载体上带neo基因,就可以用G418筛选
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