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本帖最后由 泡沫清风 于 2009-8-22 11:01 编辑 * j7 h+ d, [8 M
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接种质粒48小时,观察细胞并收集病毒:
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8 Y; d6 q: O/ | @0 p* ^0 M
应该说我的细胞状态还是不错的。一般我48小时收一次病毒,如果细胞状态好,72小时再收一次,当然病毒滴度肯定没有48小时的高。
+ {4 @" J! c( S/ t
+ Z# Z) f/ o; O2 h收集时,一般可以先2000转离心,再用0.45um的滤器过滤。不过我直接用0.45um过滤,省事。呵呵
% E6 f! }- m8 K% k. ?过滤完病毒上清可以先浓缩。50000g,4℃离心2h。但我一般不浓缩。
8 o5 E0 _9 p: a+ g* |; D: P( W如果在2、3天之内要用这批病毒可以放在4℃,如要要在以后用,就分装保存于-80℃。一般冻存一次滴度降1/3到1/2。 |
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