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本帖最后由 泡沫清风 于 2009-8-22 11:01 编辑
7 U# S, N) n4 z, M/ m1 `2 R; d6 t# q8 z
接种质粒48小时,观察细胞并收集病毒:
- B, _" X& o6 {* E) |; G- Y% { Q5 Z" _* y0 ~4 o; U! c
0 Q1 t8 n, C+ u) e8 P7 @: T& N
; G p5 h9 S* h1 J' M; V6 h5 f" h
应该说我的细胞状态还是不错的。一般我48小时收一次病毒,如果细胞状态好,72小时再收一次,当然病毒滴度肯定没有48小时的高。
" i$ X% b! z' c. D5 E! H. c
; E7 E2 E4 a* `0 |" l! f, P收集时,一般可以先2000转离心,再用0.45um的滤器过滤。不过我直接用0.45um过滤,省事。呵呵% E% {2 {1 l& K u# K$ C8 n( z4 P
过滤完病毒上清可以先浓缩。50000g,4℃离心2h。但我一般不浓缩。
% ]; o! ^7 Q3 b7 Q( M5 }如果在2、3天之内要用这批病毒可以放在4℃,如要要在以后用,就分装保存于-80℃。一般冻存一次滴度降1/3到1/2。 |
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